惡性淋巴瘤多藥耐藥性的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、山東醫(yī)科大學碩士學位論文惡性淋巴瘤多藥耐藥性的研究姓名:孫志軍申請學位級別:碩士專業(yè):病理學指導教師:周庚寅20000501在198例‘淋巴瘤中,男性130例,女性68例,年齡6—72歲,,平均42歲。臨床分期按國際標準分期(AnnArbor分期)。療效評價按實體瘤評價:CR(完全緩解),指腫瘤及所有癥狀體征完全消失至少4周;PR(部分緩解),腫瘤縮小50%以上至少4周;NC(病情無變化),病情無明顯變化至少4周;PD(疾病進展),原病

2、變增大25%以上或出現(xiàn)新的病變?;颊呱嫫冢沙醮位煏r開始至病人死亡或最后一次隨訪為止。三試劑1免疫組織化學檢測:主要試劑有抗PgP單抗(克隆號JSBl)、抗GST一丌多克隆抗體、抗TopoII。單抗(克隆號JH27)和SABC試劑盒均購自武漢博士德公司。2原位雜交檢測:地高辛(Dig)標記的寡核苷酸探針(Oligoprobe)及原位雜交(ISH)檢測試劑盒均為武漢博士德公司的產(chǎn)品。四免疫組化染色步驟1所有蠟塊5um厚切片。2組織切片

3、常規(guī)脫蠟進水。3蒸餾水新鮮配置3%過氧化氫溶液浸片室溫10分鐘。蒸餾水洗2分鐘3次。4微波修復(fù)抗原:將切片浸入蒸餾水中,微波加熱至100。C,持續(xù)2030分鐘。冷卻后進行下一步。5滴加抗原修復(fù)液,室溫lO分鐘。蒸餾水洗2分鐘3次。6滴加10%5E常血清封閉,室溫10分鐘,甩去多余血清,不洗。7滴加適當稀釋一抗(各抗體稀釋度均為1:80),置4。C冰箱內(nèi)過夜。PBS洗,2分鐘x3次。8滴加生物素化二抗,374C孵育40分鐘。PBS洗,2分

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