莫西沙星對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)iNOS和產(chǎn)生NO的影響.pdf

1、目的：研究莫西沙星(MXF)在體外對(duì)LPS誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞EA.Hy926表達(dá)誘導(dǎo)性一氧化氮合酶的mRNA和蛋白及產(chǎn)生一氧化氮的水平的影響；研究該效應(yīng)是否與核因子κB(NF-κB)活性的改變有關(guān)。以了解MXF潛在的抗炎作用及其分子機(jī)制。
　　 方法：體外培養(yǎng)血管內(nèi)皮細(xì)胞EA.Hy926，首先與5～20mg/LMXF孵育24h，隨后再用0.1mg/LLPS刺激16h，用Griess試劑分析產(chǎn)生的一氧化氮水平，以RT-PCR、Wes

2、ternblot等方法分析謗導(dǎo)性一氧化氮合酶mRNA和蛋白的表達(dá)。用Westernblot檢測(cè)經(jīng)MXF處理后的EA.Hy926細(xì)胞中NF-κB的活化情況，并用NF-κB抑制劑PDTC研究對(duì)誘導(dǎo)性一氧化氮合酶蛋白的表達(dá)及一氧化氮產(chǎn)生的影響。
　　 結(jié)果：MXF能抑制LPS誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細(xì)胞誘導(dǎo)性一氧化氮合酶的mRNA和蛋白，且能以劑量依賴(lài)方式抑制EA.Hy926細(xì)胞產(chǎn)生NO，當(dāng)MXF的濃度為5mg/L時(shí)，NO產(chǎn)生的量為(26.3±3

3、)umol/L，當(dāng)其增加到20mg/L時(shí)，NO產(chǎn)生的量降至(18.1±1.4)μmol/L，與對(duì)照組相比，抑制率達(dá)42％，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，P<0.05。用LPS與NF-kB的抑制劑PDTC共同處理EA.Hy926細(xì)胞后，誘導(dǎo)性一氧化氮合酶的蛋白表達(dá)水平及所產(chǎn)生的NO水平能被PDTC顯著地抑制。MXF處理血管內(nèi)皮細(xì)胞2h后，其細(xì)胞漿內(nèi)的NF-κB即被抑制，使其從細(xì)胞核中的p65水平明顯減少。
　　 結(jié)論：
　　 1．MXF能