梅毒患者外周血Th1-Th2類細胞因子和T細胞亞群的檢測及臨床意義.pdf

1、梅毒系由梅毒螺旋體（Treponema Pallidum，TP）引起的一種全身性、慢性的性傳播性疾病。梅毒可嚴重影響身體健康，它可以使幾乎全身各種組織器官發(fā)生病變，感染早期主要侵犯皮膚、粘膜，晚期可侵犯心血管及中樞神經(jīng)系統(tǒng)，導致嚴重的后遺癥。人感染TP后的免疫機制非常復雜，常不能完全清除，造成其潛伏體內形成長期感染。不同病期梅毒患者存在一系列細胞免疫功能失調和細胞免疫抑制現(xiàn)象，可表現(xiàn)為局部及外周血的Th/Ts比例下降，Th1/Th2的失

2、衡及其細胞因子分泌失調，血清可溶性白細胞介素2受體水平的變化等。研究梅毒患者免疫功能的狀態(tài)改變，對梅毒的預防和轉歸均有重要意義。為進一步探討Th1和Th2類輔助性T細胞在梅毒發(fā)病中的作用，本文以IFN-γ和IL-2代表Th1類細胞因子，IL-4代表 Th2類細胞因子，通過ELISA方法對一、二期梅毒患者，血清固定患者、經(jīng)治療痊愈患者及健康對照者外周血進行檢測，運用流式細胞儀分析各組T細胞亞群分布情況，并采用RT-PCR技術檢測一、二期梅

3、毒患者PBMC中Th1和Th2類細胞因子mRNA表達情況。
　　 目的：
　　 探討不同病程梅毒患者外周血單個核細胞（PBMC）中Th1類細胞因子（IL-2、IFN-γ）和Th2類細胞因子（IL-4）水平變化，分析梅毒螺旋體對機體外周血中T淋巴細胞亞群的影響，并采用RT-PCR技術，檢測一、二期梅毒患者PBMC中Th1類和Th2類細胞因子mRNA表達情況，從而了解梅毒患者外周血Th1/Th2類細胞免疫及外周血中各T淋巴細

4、胞免疫表型的特點。
　　 方法：
　　 1.雙抗體夾心ELISA法分別檢測一、二期梅毒患者、治療后血清學陰轉患者、血清固定患者及健康對照者血清中IL-2、IFN-γ、IL-4水平。
　　 2.應用流式細胞儀，分析以上各組外周血T淋巴細胞亞群（CD3、CD4、CD8、CD4/CD8）比例情況。
　　 3.采用RT-PCR技術，檢測15例一期梅毒患者，31例二期梅毒患者PBMC中Th1（IL-2、IFN-γ）

5、和Th2（IL-4、IL-10）類細胞因子mRNA表達，同時以梅毒檢測陰性的25例健康人作為對照組。
　　 結果：
　　 1.白細胞介素2結果分析及組間比較：
　　 1.1各梅毒組與正常對照組血清白細胞介素2水平比較：
　　 一期梅毒組與正常對照組相比，血清IL-2水平較正常組為高，差異有顯著性意義（P<0.05）；二期梅毒組與正常對照組相比，血清IL-2水平降低，差異有顯著性意義（P<0.01）；血清固

6、定組與正常對照組相比，血清IL-2水平較正常組低，差異具有顯著性意義（P<0.05）；治愈組與正常對照組相比，血清IL-2水平無顯著性差異（P>0.05）。
　　 1.2各梅毒組間血清白細胞介素2水平比較：
　　 一期梅毒組的血清IL-2水平顯著高于二期梅毒組、血清固定組和治愈組的血清IL-2水平（P<0.01）；而二期梅毒組的血清IL-2水平明顯低于血清固定組的IL-2水平（P<0.01）。
　　 2.白細胞介

7、素4結果分析及組間比較：
　　 2.1各梅毒組與正常對照組血清白細胞介素4水平比較：
　　 一、二期梅毒組與正常對照組相比，血清IL-4水平均升高，差異有顯著性意義（P<0.05）；血清固定組和治愈組與正常對照組相比，血清IL-4水平無顯著性差異（P>0.05）。
　　 2.2各梅毒組和血清白細胞介素4水平比較：
　　 二期梅毒組的血清IL-4水平顯著高于其它各組的血清IL-4水平（P<0.05）；一期梅

8、毒組的血清IL-4水平高于血清固定組和治愈組的血清IL-4水平（P<0.05）；治愈組和血清固定組之間的血清IL-4水平差異無顯著性意義（P>0.05）。
　　 3.IFN-γ結果分析及組間比較：
　　 3.1各梅毒組與正常對照組血清IFN-γ水平比較：
　　 一、二期梅毒組與正常對照組相比，血清IFN-γ水平均較正常組為高，差異有顯著性意義（P<0.05）；血清固定組及治愈組與正常對照組相比，血清IFN-γ水平

9、無顯著性差異（P>0.05）。
　　 3.2各梅毒組間血清IFN-γ水平比較：
　　 一期梅毒組的血清IFN-γ水平顯著高于二期梅毒組、血清固定組和治愈組的血清IFN-γ水平，差異有顯著性意義（P<0.05）；二期梅毒組的血清IFN-γ水平高于血清固定組和治愈組的血清IFN-γ水平，差異有顯著性意義（P<0.05）；血清固定組與治愈組之間差異無顯著性意義（P>0.05）。
　　 4.RT-PCR檢測一、二期梅毒組

10、PBMC中Th1和Th2類細胞因子mRNA表達結果分析：
　　 4.1一、二期梅毒組PBMC中Th1類細胞因子（IL-2、IFN-γ）及Th2類細胞因子（IL-4、IL-10）mRNA陽性率與正常對照組相比較：
　　 與正常對照組相比，一期梅毒組PBMC中Th1類細胞因子（IL-2、IFN-γ）mRNA陽性率顯著升高（P<0.05），二期梅毒組Th2類細胞因子（IL-4、IL-10）mRNA陽性率顯著升高（P<0.05）

11、。
　　 4.2一、二期梅毒組之間PBMC中Th1類細胞因子（IL-2、IFN-γ）及Th2類細胞因子（IL-4、IL-10）mRNA陽性率比較：
　　 一期梅毒組IFN-γ mRNA陽性率較二期梅毒組顯著升高；一期梅毒組PBMC中Th1類細胞因子（IL-2、IFN-γ）mRNA表達強度較二期梅毒組顯著升高（P<0.01），而Th2類細胞因子（IL-4、IL-10）mRNA表達強度則顯著減低（P<0.01）。
　　

12、 5.流式細胞儀結果分析：
　　 5.1一、二期梅毒組及對照組CD3、CD4、CD8陽性淋巴細胞比例及CD4/CD8比值之間的組間比較：
　　 一期梅毒組CD8陽性淋巴細胞比例與對照組的檢測結果相比，差異無顯著性意義（P>0.05），CD3、CD4陽性淋巴細胞比例及CD4/CD8比值較對照組增高，差異有顯著性意義（P<0.05）；二期梅毒組CD3、CD4及CD8陽性淋巴細胞比例與對照組的檢測結果相比，CD3及CD4淋巴

13、細胞陽性率均低于對照組，差異有顯著性意義（P<0.05），而CD8淋巴細胞陽性率高于對照組，差異有顯著性意義（P<0.05），CD4/CD8比值低于對照組，有顯著性差異（P<0.05）；一、二期梅毒組之間比較：一期梅毒組CD3、CD4陽性淋巴細胞及CD4/CD8比值高于二期梅毒組，而CD8淋巴細胞陽性率低于二期梅毒組，差異均有顯著性意義（P<0.05）。
　　 5.2血清固定組外周血CD3、CD4、CD8陽性淋巴細胞及CD4/C

14、D8比值與對照組比較：
　　 血清固定組外周血CD3及CD4淋巴細胞陽性率低于對照組，差異有顯著性意義（P<0.05）；而CD8淋巴細胞陽性率高于對照組，差異有顯著性意義（P<0.05）；CD4/CD8比值低于對照組，有顯著性差異（P<0.05）。
　　 5.3梅毒治愈組CD3、CD4、CD8陽性淋巴細胞比例及CD4/CD8比值與對照組比較：
　　 兩組比較，CD3、CD4及CD8陽性淋巴細胞比例及CD4/CD8

15、比值，差異均無顯著性意義（P>0.05）。
　　 結論：
　　 1.梅毒患者外周血中Th1/Th2類細胞因子的平衡失調，由一期梅毒的Th1類細胞因子占優(yōu)勢向Th2類細胞因子轉換；對梅毒的發(fā)病機制作了進一步闡釋，也為對梅毒患者在常規(guī)驅梅治療的基礎上加用免疫調節(jié)劑（如干擾素、白介素等）進行綜合治療提供了依據(jù)；檢測Th1/Th2類細胞因子水平和Th1/Th2類細胞因子mRNA的表達對評價梅毒患者的免疫狀況和指導臨床對患者進行免

16、疫調節(jié)治療有一定的應用價值。
　　 2.一、二期梅毒患者和血清固定梅毒患者存在細胞免疫不平衡和免疫抑制；一期梅毒CD3、CD4陽性淋巴細胞增高利于梅毒螺旋體的清除；二期梅毒CD3、CD4陽性淋巴細胞減低降低了機體清除梅毒螺旋體的能力，而CD8陽性淋巴細胞增高降低了機體產(chǎn)生抗梅毒抗體的能力；梅毒血清固定患者存在細胞免疫功能低下，在梅毒患者血清固定病程中起著一定的作用；臨床上在梅毒的治療過程中，應監(jiān)測機體的免疫狀態(tài)，調節(jié)和增強機體免