兔VX-2口底癌動(dòng)物模型建立的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：建立適合局部治療研究用的兔VX-2口底癌動(dòng)物模型，并對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行研究。同時(shí)，探討腫瘤模型影像學(xué)及病理學(xué)表現(xiàn)，為口底癌治療提供研究平臺(tái)。
　　 方法：⑴荷瘤種兔的制作首先對(duì)凍存的VX-2瘤組織塊進(jìn)行相應(yīng)的復(fù)蘇，然后建立荷瘤種兔以獲得實(shí)驗(yàn)中需要的腫瘤組織塊。⑵兔口底惡性腫瘤模型的制作30只純種的新西蘭大白兔，雌雄不限，兔齡2～3月，體重1.5～2.0kg，隨機(jī)分成2組(每組15只)，均在標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)室飼養(yǎng)；從荷瘤種兔身上剝離

2、VX-2腫瘤組織塊，制備成移植所用的一定大小的VX-2腫瘤組織塊及細(xì)胞懸液，分別采用VX-2瘤塊組織植入法(A組)及改良瘤細(xì)胞懸液注射法(B組)接種于實(shí)驗(yàn)兔的口底正中區(qū)以制作兔VX-2口底惡性腫瘤模型。⑶觀察指標(biāo)及統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)觀察記錄實(shí)驗(yàn)兔的術(shù)后清醒時(shí)間、并發(fā)癥情況、實(shí)驗(yàn)兔的精神、食欲、活動(dòng)有無(wú)異常；分別于實(shí)驗(yàn)兔接種術(shù)后第1周、第2周、第3周、第4周時(shí)觀察瘤灶的大體表現(xiàn)，且分別行顱腦及頸部的CT及MR掃描檢查，檢查口底部位有無(wú)腫瘤形成及頸部

3、有無(wú)腫大及轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)，記錄肉眼及CT及MR掃描檢查三種手段所發(fā)現(xiàn)的腫瘤的大小、數(shù)目、部位，記錄CT及MR掃描檢查發(fā)現(xiàn)的轉(zhuǎn)移腫大淋巴結(jié)的數(shù)目、大小和部位，統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)兔的成瘤率；統(tǒng)計(jì)實(shí)驗(yàn)兔的頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率及肺轉(zhuǎn)移率；計(jì)算腫瘤的生長(zhǎng)率，對(duì)兩組實(shí)驗(yàn)兔成瘤率及頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率及肺轉(zhuǎn)移率進(jìn)行比較；觀察實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自然生存情況；死亡后尸檢；腫瘤組織、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)及器官經(jīng)10％福爾馬林固定后行病理檢查。
　　 結(jié)果：26只實(shí)驗(yàn)兔發(fā)現(xiàn)瘤灶，總成瘤率8

4、6.67％(26/30)，其中組織塊植入法(A組)成功率為80.00％(12/15)，改良瘤細(xì)胞懸液注射法(B組)成功率為93.33％(14/15)，兩組接種成功率無(wú)顯著差異(P>0.05)；本實(shí)驗(yàn)中26只成瘤兔中20只發(fā)現(xiàn)頸部轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)，頸淋巴結(jié)總轉(zhuǎn)移率為76.92％(20/26)，10只發(fā)生肺轉(zhuǎn)移，總肺轉(zhuǎn)移率為38.46％(10/26)；其中改良瘤細(xì)胞懸液注入組的局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為92.86％(13/14)，肺轉(zhuǎn)移率為57.14％(

5、8/14)，均為最高；瘤組織塊植入組的局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率為58.33％(7/12)，肺轉(zhuǎn)移率為16.67％(2/12)；兩組實(shí)驗(yàn)兔的成瘤率、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率、肺轉(zhuǎn)移率相比差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。整個(gè)模型建立過(guò)程操作步驟簡(jiǎn)單，成瘤率高。A、B兩組實(shí)驗(yàn)兔的飲食、精神、活動(dòng)等一般生物性特點(diǎn)無(wú)明顯差異。觀察所建成的兔口底癌動(dòng)物模型發(fā)現(xiàn)VX-2腫瘤經(jīng)歷了3個(gè)主要階段：腫瘤迅速增長(zhǎng)階段、腫瘤中心壞死階段、表面破潰階段，平均生存期約為6～8周。瘤體和淋巴結(jié)

6、標(biāo)本病理切片HE染色鏡下觀察，均為中分化鱗癌，證實(shí)成瘤及出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移。
　　 結(jié)論：采用組織塊移植法及改良細(xì)胞懸液注射法兩種方法制作兔VX-2口底癌動(dòng)物模型，其成瘤率、頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率、肺轉(zhuǎn)移率、生長(zhǎng)率、腫瘤性質(zhì)、腫瘤生長(zhǎng)特點(diǎn)等比較均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。采用CT及MR兩種影像學(xué)檢查手段對(duì)瘤灶進(jìn)行動(dòng)態(tài)的檢測(cè)、評(píng)價(jià)，可以更加及時(shí)、準(zhǔn)確地觀察瘤灶的發(fā)生、發(fā)展等影像學(xué)改變。通過(guò)上述兩種操作方法制作的兔口底部鱗癌模型具有操作簡(jiǎn)單、耗時(shí)短、重復(fù)