應(yīng)用HRM法檢測(cè)結(jié)直腸癌患者KRAS和EGFR基因突變.pdf_第1頁(yè)
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1、目的：研究高分辨率熔解曲線（high resolution melting，HRM）分析法檢測(cè)結(jié)直腸癌患者DNA中KRAS基因和EGFR基因突變，建立一種簡(jiǎn)單、可靠的檢測(cè)KRAS和EGFR基因型方法。
　　方法：收集在中南大學(xué)湘雅醫(yī)院和湖南省腫瘤醫(yī)院2012年9月至2012年12月病理學(xué)確診為結(jié)直腸癌患者血標(biāo)本70例。提取患者血樣本中的基因組DNA，設(shè)計(jì)PCR引物并擴(kuò)增目的基因片段，用HRM法檢測(cè)結(jié)直腸癌KRAS基因2號(hào)和3號(hào)外顯

2、子、EGFR基因19和21號(hào)外顯子的突變，同時(shí)采用Sanger測(cè)序法驗(yàn)證HRM法的準(zhǔn)確性，并通過雙側(cè)x2檢驗(yàn)分析兩種方法之間的差異性。
　　結(jié)果：在70例樣本中，用HRM法檢測(cè)KRAS基因2號(hào)外顯子有18例突變，分別為G12D(6例)、G12C（9例）、G12V（3例），通過測(cè)序法檢測(cè)KRAS基因2號(hào)外顯子有17例突變;KRAS基因3號(hào)外顯子未發(fā)生突變、EGFR基因19號(hào)外顯子有3例突變、EGFR基因21號(hào)外顯子未發(fā)生突變。利用統(tǒng)

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