體外擴增人臍帶血CD34+細胞移植治療新生大鼠腦癱模型的研究.pdf

1、目的：
　　 研究人臍帶血CD34+細胞經(jīng)體外擴增后對新生大鼠腦癱模型的治療作用，并對其治療機理進行初步探討;同時比較臍帶血單個核細胞(MNCs)和CD34+細胞對新生大鼠腦癱模型的治療效果，為臨床細胞治療腦癱提供參考依據(jù)。
　　 方法：
　　 1)參照Rice法，對出生7天的SD大鼠行一側頸總動脈結扎，結合缺氧處理的方法制作新生大鼠腦癱模型，成功建模3周后(P28)，觀察其體重、行為學及腦組織病理學改變，并檢測

2、腦組織中凋亡相關基因和轉錄因子NF-κBp50和p65的表達變化。
　　 2)成功建立模型后第7天(P14)，將臍帶血MNCs、CD34+細胞和CD34+細胞體外擴增后的細胞經(jīng)損傷同側頸靜脈移植到大鼠體內。細胞移植2周后(P28)，進行體重、行為學及組織病理學分析，并采用實時熒光定量RT-PCR(Real-timeRT-PCR)檢測凋亡相關基因的表達變化，利用蛋白質免疫印記法(Westernblot)檢測轉錄因子NF-kB的活化

3、水平。
　　 結果：
　　 1)腦缺血缺氧損傷導致大鼠體重下降;行為異常，主要表現(xiàn)為不對稱擺動;損傷同側大腦半球出現(xiàn)液化，腦實質明顯減少，損傷對側未見液化現(xiàn)象;損傷同側腦組織中凋亡相關基因（TNFα、TNFR1、TNFR2、Fas和CD40），轉錄因子NF-κBp50、p65表達上調。模型之間一致性、重復性好，建模成功率高。
　　 2)與損傷組比較，三種細胞治療后大鼠體重均明顯增加，腦組織損傷減輕，凋亡相關基因和

4、轉錄因子NF-κBp50、p65的表達均降低;MNCs對腦癱模型的治療效果優(yōu)于CD34+細胞;CD34+細胞擴增后對新生大鼠腦癱模型仍有治療效果，且其療效優(yōu)于CD34+細胞組。
　　 結論：
　　 應用一側頸總動脈結扎結合缺氧的方法制作新生大鼠腦癱模型損傷程度一致、穩(wěn)定、成功率高;MNCs、CD34+細胞及CD34+細胞體外擴增后都對腦癱模型有一定治療作用;MNCs的治療效果優(yōu)于CD34+細胞;CD34+細胞擴增后的神經(jīng)