血甘油三酯對肝臟胰島素抵抗的影響和脂肪酸對肝細胞葡萄糖攝取功能的影響.pdf

1、肥胖和2型糖尿病(type2diabetesmellitus，T2DM)伴高甘油三酯血癥患者血漿游離脂肪酸(freefattyacids，F(xiàn)FAs)水平往往明顯升高，高FFAs血癥是肥胖患者出現(xiàn)胰島素抵抗(insulinresistance，IR)和T2DM的主要原因之一。FFAs主要通過干擾胰島素對靶組織的葡萄糖攝取和利用功能，導致胰島素抵抗，但其具體分子機制尚不明確。另外，關于脂肪酸的不同戍分－飽和脂肪酸(saturatedfatt

2、yacids，SFAs)和不飽和脂肪酸(unsaturatedfattyacids，UFAs)分別在IR和T2DM的發(fā)生、發(fā)展過程中起到的作用及其相互關系目前亦不明確。 肝臟是體內(nèi)調(diào)節(jié)葡萄糖代謝的重要組織，是胰島素作用的主要靶器官。胰島素刺激后，肝臟葡萄糖異生和肝糖原分解減少，肝臟葡萄糖輸出降低，從而維持血漿葡萄糖濃度在一定的范圍之內(nèi)。有實驗發(fā)現(xiàn)，高濃度的FFAs可以促進肝臟葡萄糖輸出。本研究分為兩部分：首先以胰島紊樣生長因子結(jié)

3、合蛋白-1(insulin-likegrowthfactorbindingprotein-1，IGFBP-1)為肝臟胰島素抵抗的標志，觀察了高甘油三酯和T2DM患者血清IGFBP-1的變化及其對肝臟胰島素抵抗的影響。另外，通過體外培養(yǎng)人肝細胞瘤細胞株HepG2，觀察血漿FFAs的不同成分，包括SFAs和多不飽和脂肪酸(polyunsaturatedfattyacids，PUFAs)對肝細胞葡萄糖攝取的影響及其劑量相關性，并進一步從胰島素

4、受體及受體后水平探討SFAs和PUFAs影響胰島素作用的可能機制。 一、2型糖尿病及高甘油三酯血癥患者血清IGFBP-1水平與胰島素敏感性的相關性分析 目的:觀察不同糖、脂代謝人群血清中IGFBP-1的水平，并分析其與年齡、性另、體重指數(shù)、糖代謝、脂代謝等多項指標的關系，探討血甘油三酯升高對肝臟胰島素敏感性及胰島素樣生長因子系統(tǒng)的影響。 研究對象與方法:66名受試者，包括38例男性和28例女性，平均年齡50.33

5、±10.62歲；其中T2DM不合并高甘油三酯血癥15例(男8例，女7例)，T2DM合并高甘油三酯血癥21例(男15例，女6例)，單純高甘油三酯血癥15例(男9例，女6例)，正常對照15例(男8例，女7例)。應用ELISA法測定血清IGFBP-1水平，化學發(fā)光法測定空腹胰島素(FINS)，同時測定血脂、空腹血漿葡萄糖(FPG)。所有受試者均進行身高、體重、腰圍、臀圍的測量，計算體重指數(shù)(BMI)和腰臀比(WHR)。應用穩(wěn)態(tài)模式評估法Hom

6、a-IR指數(shù)(Homa-IR=FINS×FPG/22.5)代表胰島素抵抗指數(shù)。 結(jié)果:1.單純高甘油三酯血癥人群血清IGFBP-1水平(2.37±0.46ng/ml)與正常對照組(3.36±0.29ng/ml)相比明顯降低(P＜0.05)；T2DM合并高甘油三酯血癥人群血清IGFBP-1水平(3.01±0.47ng/ml)較T2DM不合并高甘油三酯血癥人群(3.45±0.37ng/ml)下降，具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；而T

7、2DM人群血清IGFBP-1水平與正常對照組相比無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05)；2.多因素相關分析顯示血清IGFBP-1水平與BMI(r=-0.573，P=0.000)、甘油三酯(TG)(r=-0.387，P=0.002)、FINS(r=-0.485，P=0.000)、Homa-IR(r=-0.306，P=0.016)呈負相關；與高密度脂蛋白(HDL)(r=0.431，P=0.001)呈正相關；與年齡、WHR、HbA1c、總膽固醇(T

8、C)、低密度脂蛋白(LDL)、FPG等指標無明顯相關性(P＞0.05)。 結(jié)論:高甘油三酯血癥人群血清IGFBP-1明顯下降，存在明顯肝臟胰島素抵抗。血清IGFBP-1水平與血甘油三酯水平、體脂分布及胰島素抵抗明顯相關。血甘油三酯增高是導致肝臟胰島素抵抗的原因之一，其導致肝臟胰島素抵抗的作用較血糖升高更為明顯。 二、軟脂酸及花生四烯酸對HepG2細胞葡萄糖攝取的影響及其可能機制 目的:探討不同濃度的飽和脂肪酸-軟

9、脂酸(palmiticacid，PA)和多不飽和脂肪酸-花生四烯酸(arachidonicacid，AA)對HepG2細胞葡萄糖攝取的影響及其可能機制。 方法:HepG2細胞分別用不同濃度的PA或AA孵育24h，以2-deoxy-[3H]-D-glucose法測定葡萄糖的攝取率；用RT-PCR方法檢測HepG2細胞內(nèi)胰島素受體(insulinreceptor，InsR)及葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(glucosetransporter2，

10、GLuT2)mRNA含量；提取蛋白后用Western印跡法檢測HepG2細胞內(nèi)InsR及GLuT2的蛋白水平。 結(jié)果:1.PA在100和200μmol/L濃度情況下刺激HepG2細胞的葡萄糖攝取，分別為對照組的145％和132％(P均＜0.01)；在濃度為400和600μmol/L時，抑制HepG2細胞的葡萄糖攝取，為對照組的72％和37％(P均＜0.01)；2.5～15μmol/L的AA均可刺激HepG2細胞的葡萄糖攝取，在1

11、0μmol/L時作用最強，達到對照組的129％(P＜0.01)；用10μmol/L的AA與100和200μmol/L的PA共同處理細胞后，細胞的葡萄糖攝取率無明顯改變；但10μmol/L的AA可以部分阻斷400和600μm0l/L的PA引起的HepG2細胞葡萄糖攝取的減少，分別為對照組的99％和83％，明顯高于單獨PA處理組的72％和37％(P均＜0.01)；3.100和200μmol/L的PA均可增加HepG2細胞的InsR和GLuT

12、2蛋白和muRNA的表達，但在400μmol/L濃度時對InsR和GLuT2蛋白和mRNA表達有抑制作用；10μmol/L濃度的AA可以明顯刺激HepG2細胞的InsR及GLuT2蛋白和mRNA的表達，雖然對100和200μmol/L濃度的PA的作用無明顯作用，但可以阻斷400μmol/L的PA引起的HepG2細胞InsR及GLuT2蛋白和mRNA水平的降低。 結(jié)論:高濃度的飽和脂肪酸可能通過抑制HepG2細胞的InsR和GLu