大鼠大腦微血管形態(tài)構筑的定量研究.pdf

1、目的:定量研究大鼠大腦部分區(qū)域的微血管構筑的特征;為臨床腦血管疾患診斷、以及病理生理學研究提供計量形態(tài)學資料和參數(shù).方法:選取健康Wistar大鼠20只,體重180~250g.10％烏拉坦(1g/kg)腹腔內(nèi)麻醉,經(jīng)升主動脈插管,溫生理鹽水60~80ml快速沖洗,繼以2％戊二醛、2％的多聚甲醛、2％的單寧酸混合媒染固定液200~250ml灌注,固定2~4小時后取出大腦.按區(qū)分割保存,準備連續(xù)冰凍切片.取10例腦標本,按標記好的大腦不同區(qū)

2、域(額、頂、枕區(qū)),分別做連續(xù)冠狀切片;另取10例分別按不同分區(qū)作矢狀切片,每個大腦區(qū)域取5張切片,每個切片厚50μm,用蒸餾水漂洗2次后,置于2％氯化鐵溶液中呈色20分鐘,再經(jīng)蒸餾水漂洗3次,梯度酒精脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片.應用標定好的目鏡測微器按體視學方法,測量大腦皮質(zhì)相關區(qū)域微血管直徑;每張切片不同區(qū)域在100倍顯微鏡下,各選3個視野計數(shù)微血管斷面輪廓數(shù),然后取平均值作為微血管密度(MVD)值;用CMIAS圖像分析系統(tǒng)測定