真菌竹黃活性成分的藥理作用研究.pdf

1、目的:本研究旨在分離天然藥物真菌竹黃中具有藥理作用的活性成分;以TNFα誘導的小鼠成纖維細胞L929為細胞模型，初步探索真菌竹黃活性成分雙向調控細胞增殖的物質基礎及分子機理;以人胃癌細胞BGC823為細胞模型，研究真菌竹黃活性成分對BGC823細胞的增殖抑制作用。
　　 方法:(1)索式提取法和聚酰胺層析柱法分離真菌竹黃中調控細胞增殖的活性成分;(2) SRB法測定竹黃組分extA、extB、extC、extD對L929、BGC

2、823的增殖抑制情況;(3) Hoechst染色法觀察L929、BGC823的細胞形態(tài)學變化;(4)Western Blotting檢測L929內NF-κB、COX-2、FLIP蛋白表達水平，檢測BGC823內NF-κB、FLIP蛋白表達水平。
　　 結果:(1)結合傳統(tǒng)提取法及現(xiàn)代提取工藝，將真菌竹黃初步分離為組分extA、extB、extC、extD;(2) extA在0.03μg/ml-3.75μg/ml時，可有效拮抗TN

3、Fα對L929的增殖抑制作用，7.5μg/ml時則促進其增殖抑制作用;(3) extA可有效拮抗TNFα誘導的L929中NF-κB蛋白表達增加的過程，具有時效性，對COX-2蛋白表達水平影響不大，同時抑制TNFα誘導的FLIP表達水平下降過程，呈濃度正相關依賴趨勢;(4) extA、extB可有效抑制BGC823增殖，且extB抑制增殖能力更強;(5) extB可上調BGC823中的NF-κ B、FLIP蛋白表達水平，呈濃度正相關依賴趨