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1、目的:研究從中華眼鏡蛇毒中分離純化出的金屬蛋白酶atrase A和B抑制血小板聚集的作用及其部分機(jī)制;并對(duì)補(bǔ)體激活引起血小板活化、聚集的抑制作用進(jìn)行評(píng)價(jià)。方法:采用比濁法測(cè)定atrase A和B對(duì)六種誘導(dǎo)劑(ADP、AA、PAF、膠原、瑞斯托霉素、凝血酶)引起的血小板聚集的抑制作用,蛋白免疫印跡法測(cè)定atrase A和B對(duì)血小板膜糖蛋白GPIb和vWF的裂解作用;采用眼鏡蛇毒因子激活補(bǔ)體,觀察atraseA和B對(duì)補(bǔ)體激活引起血小板聚集的
2、抑制作用,流式細(xì)胞儀檢測(cè)血小板活化膜P-選擇素和糖蛋白GPIIb/Ⅲa的表達(dá)。結(jié)果:AtraseA和B能顯著抑制瑞斯托霉素和凝血酶誘導(dǎo)的血小板聚集,并呈一定的劑量和時(shí)間依賴性,和血小板預(yù)孵5min,Atrase A和B對(duì)上述六種誘導(dǎo)劑引起的血小板聚集有較弱的抑制作用,延長(zhǎng)至30min有明顯的抑制作用。蛋白免疫印跡法結(jié)果顯示atrase A和B特異性的水解血小板膜糖蛋白GPIb,但對(duì)vWF則沒有裂解作用。Atrase A和B還能有效抑制補(bǔ)
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