8-羥基喹啉及其類似物抑制體外H460細胞增殖的機理研究.pdf

1、山東大學博士學位論文8羥基喹啉及其類似物抑制體外H460細胞增殖的機理研究姓名：祁銘華申請學位級別：博士專業(yè)：藥物化學指導教師：閆兵20090407山東大’≯博士學位淪文件下H460細胞中Cu2的含量，運用紫外光譜滴定法測定ox—Cu2和CQCu2在體外細胞環(huán)境中的結合常數(shù)Kbl和Kbz。結果發(fā)現(xiàn)這兩種有機配體本身具有抑制H460細胞生長的活性，且Ox的活性比CQ的活性強，內源銅的介入可以促進有機配體對H460細胞的生長抑制作用。通過測

2、定細胞中Cu2含量，發(fā)現(xiàn)有機配體CQ、Ox能促使細胞中Cu2含量的升高，利用光譜分析測得Ox、CQ能有效的結合Cu2，0xCu2的結合常數(shù)Kbl比CQ—Cu2結合常數(shù)Kb2大。第二部分，我們研究了70個Ox類似物對H460細胞的毒性，結果發(fā)現(xiàn)當Ox及其CQ的8位一OH被其它取代基取代后對H460細胞沒有毒性，Ox類似物的抗腫瘤活性依賴于Cu2，內源性Cu2存在時17個Ox類似物表現(xiàn)出抗腫瘤活性。通過比較17個抗腫瘤活性依賴于銅的Ox類似

3、物的IC50，發(fā)現(xiàn)類似物1#、5#、6#和115#對癌細胞生長的抑制作用較強，但是比Ox、CQ弱。利用紫外光譜分析這些化合物與cu2的結合作用，發(fā)現(xiàn)Ox類似物與cu2不結合。第三部分，通過進一步研究Ox、CQ及其17個有活性的化合物對H460細胞的生長抑制作用，發(fā)現(xiàn)17個化合物在內源性銅的介入下對H460細胞的生長抑制作用增強。著重研究115#、CQ、Ox對細胞中cu2含量的影響，發(fā)現(xiàn)Ox及其類似物能促使細胞內銅含量的升高，其中Ox把C

4、u2帶入細胞內的量比CQ帶入的多；而類似物115#帶入Cu2的量較少。另外我們測定了有無內源性銅的條件下，H460細胞中ROS的水平變化，發(fā)現(xiàn)加入Ox、CQ、及其有活性的17個化合物都能促使H460細胞中ROS含量的升高，但是通過比較發(fā)現(xiàn)ROS含量的升高不是化合物抑制H460細胞增殖的主要原因。第四部分，運用HPLC／MS／UV檢測器，對用于生物活性篩選的50個不同結構的化合物進行絕對定量，發(fā)現(xiàn)HPLC／MS／UV檢測器絕對定量對用于生