血管性癡呆大鼠行為學及神經(jīng)病理研究.pdf

1、目的：
　　通過對血管性癡呆大鼠模型行為學及病理學特征的觀察和分析，探討VD的可能發(fā)病機制，為早期干預(yù)提供一定的理論基礎(chǔ)。
　　方法：
　　經(jīng)Morris水迷宮訓練法篩選認知水平相近的大鼠納入實驗，以D-半乳糖刺激法制備老化大鼠模型，并隨機分為對照組、假手術(shù)組、手術(shù)2周組、手術(shù)4周組和手術(shù)6周組。手術(shù)2周組、4周組和6周組采用改良四血管阻斷(4-VO)法建立VD動物模型，以Morris水迷宮檢測大鼠VD模型制備后2周、

2、4周、6周的的平均逃逸潛伏期評價學習和記憶功能，并與空白對照組及假手術(shù)組比較差異。所有大鼠均在Morris水迷宮檢測后當天處死，等份取全腦和海馬，全腦用于制備病理切片，常規(guī)HE染色，光鏡下觀察海馬區(qū)神經(jīng)元形態(tài)學變化及白質(zhì)區(qū)密度；海馬用于組織勻漿，以ELISA試劑盒測定膽堿能遞質(zhì)Ach含量，以RT-PCR測定神經(jīng)性膽堿能受體nAchRα4、α7的mRNA表達。
　　結(jié)果:
　　（1）行為學比較
　　經(jīng)Morris水迷宮訓

3、練1周并分組的大鼠，造模前各組之間逃避潛伏期無顯著性差異（P>0.05）；造模后，假手術(shù)組和對照組大鼠逃避潛伏期無顯著性差異（P>0.05），而手術(shù)組大鼠逃避潛伏期較對照組和假手術(shù)組均明顯延長（P<0.05）；且2、4、6周各手術(shù)之間比較，也有顯著性差異（P<0.05），表現(xiàn)為隨著術(shù)后時間的延長，逃避潛伏期持續(xù)延長。
　　（2）海馬神經(jīng)元形態(tài)比較
　　HE染色后，光鏡下可清晰觀察神經(jīng)細胞，其中胞漿呈淡紅色，核呈藍黑色。對照組

4、和假手術(shù)組大鼠海馬CA1區(qū)神經(jīng)元排列整齊、緊密，結(jié)構(gòu)完整，胞漿豐富，神經(jīng)元細胞核和膠質(zhì)細胞無異常。VD模型組海馬CA1區(qū)神經(jīng)元排列紊亂，散布，神經(jīng)元結(jié)構(gòu)遭到破壞，體積減小，細胞核變性，固縮成三角形或不規(guī)則形，以術(shù)后第6周大鼠表現(xiàn)最為明顯。
　　（3）腦區(qū)白質(zhì)形態(tài)比較
　　HE染色后，光鏡下可見對照組和假手術(shù)組大鼠白質(zhì)區(qū)細胞排列規(guī)整、密集，無疏松；VD模型組白質(zhì)區(qū)軸索密度明顯減少，出現(xiàn)空泡樣病理結(jié)構(gòu)；且隨著造模時間的延長，病理

5、變化趨于嚴重，以術(shù)后第6周大鼠表現(xiàn)最為明顯。
　　（4）Ach含量測定及其受體的變化
　　與對照組相比，假手術(shù)組Ach含量無顯著變化（P>0.05），而VD模型2、4、6周組大鼠Ach含量依次顯著降低（P<0.05）。nAchα4、α7 mRNA表達：與對照組相比，假手術(shù)組nAchRα4、α7的mRNA表達無顯著變化（P>0.05），而VD模型2、4、6周組大鼠nAchRα4、α7的mRNA表達依次顯著降低（P<0.05）。

6、
　　結(jié)論:
　?。?）D-半乳糖刺激老化結(jié)合4-VO法栓塞椎動脈和頸總動脈的方法制備VD大鼠模型，可同時模擬VD的老齡化和腦血管缺血態(tài)，可行性高。
　?。?）海馬CA1區(qū)神經(jīng)細胞的減少是大鼠學習、記憶能力下降的病理學基礎(chǔ)。
　　（3）腦白質(zhì)疏松是VD發(fā)生另一主要病理學基礎(chǔ)。
　?。?）海馬區(qū)膽堿能神經(jīng)遞質(zhì)Ach含量減少，以及神經(jīng)性膽堿能受體nAchα4、α7 mRNA表達下調(diào)，導致膽堿能通路受到抑制，為V