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文檔簡介
1、目的:
1、探討脊髓損傷繼發(fā)性損害的機制;2、研究環(huán)孢素A對大鼠急性脊髓損傷后繼發(fā)性損害的保護作用。
方法:采用改良Allen's法建立大鼠急性脊髓損傷實驗動物模型。將成年SD大鼠隨機分為單純椎板切除陰性對照組(A組)、急性脊髓損傷組(B組)和急性脊髓損傷后小劑量環(huán)孢素A治療組(C組),C組在損傷后早期從尾靜脈注射小劑量環(huán)孢素A治療。各組大鼠于損傷后1、7、14、28d應用BBB評分評價神經功能狀況;分別在術
2、后1、3、7、14d處死各組大鼠,分別取受損節(jié)段脊髓行HE染色及免疫組化染色觀察形態(tài)學變化;應用實時熒光定量PCR技術(RealTime-PCR)方法觀察OMgp mRNA的表達;同時應用Westenr-blot方法測定各組相應時間點OMgp表達量。
結果:
1、神經功能學BBB評分:與對照組相比,損傷組和治療組大鼠神經功能明顯減退,損傷組功能減退最為顯著,治療組的BBB評分明顯優(yōu)于損傷組,差別具有統(tǒng)計學意義
3、。
2、脊髓損傷區(qū)域的HE染色改變:光鏡下見損傷后1d時灰質內出現(xiàn)片狀出血、中央區(qū)碎裂,軸突中斷及脫髓鞘改變;3d時神經元腫脹,細胞核固縮,空洞形成,膠質細胞減少;7d殘存神經元數(shù)量減少,膠質細胞增生,膠質疤痕形成;14d脊髓損傷區(qū)出現(xiàn)囊腔樣變。
3、免疫組織化學觀察:OMgp陽性反應位于少質膠質細胞及神經元細胞膜,在大鼠急性損傷脊髓組織中,OMgp表達量明顯增加,對照組神經元中有少量OMgp陽性表達,損傷后
4、OMgp的表達逐漸增高,損傷7d時OMgp表達明顯達到高峰,然后緩慢下降,至14d時表達仍高對照組。在小劑量CsA治療的大鼠急性損傷脊髓組織中各個時間點OMgp的表達量較損傷組明顯降低,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
4、Westem-bloting和RT-PCR檢測:在蛋白和mRNA水平OMgp表達趨勢一致,對照組可見OMgp mRNA和蛋白的少量表達,脊髓損傷后1d表達開始增加,7d時表達達到高峰,損傷組與治療組比
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