應用iTRAQ技術篩選兒童皮質發(fā)育障礙性癲癇差異性表達蛋白質.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：本文旨在篩選兒童皮質發(fā)育障礙性癲癇中差異性表達的蛋白，從而以尋找其生物學標志物以及治療的潛在靶點。
　　方法：以兒童皮質發(fā)育障礙性癲癇腦組織（皮質發(fā)育障礙組）以及創(chuàng)傷后因顱內高壓術后的兒童正常腦組織（對照組）為對象。采用同位素相對標記與絕對定量技術（isobaric tag for relative and absolute quantification，iTRAQ）結合雙向液相色譜與串聯質譜（2D liquid chrom

2、atograph electrospray tandem mass spectrometry，2D-LC-MS/MS）來鑒定兒童皮質發(fā)育障礙性癲癇差異性表達蛋白，對所獲得差異性蛋白質進行生物信息學分析，從而篩選出具有潛在研究價值的候選蛋白。最后應用實時定量PCR和蛋白質免疫印跡，免疫組化方法驗證這些候選蛋白在兒童皮質發(fā)育障礙性癲癇中的表達情況。
　　結果：通過iTRAQ及2D-LC-MS/MS方法，一共鑒定出153種蛋白質在兒童皮

3、質發(fā)育障礙性癲癇腦組織及兒童正常腦組織中有表達差異（其中在兒童皮質發(fā)育障礙性癲癇腦組織中64種蛋白質上調，89種蛋白質下調；P<0.05）。通過GO（Gene ontology）功能分析提示153種差異性蛋白主要參與酶催化活性的調節(jié)，蛋白質功能相互作用網狀圖發(fā)現transferri(TF)、apolipoprotein A1(APOA1)、alpha-2-macroglobulin(A2M)、ATPase(ATP6V1A)、viment

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