輻照對(duì)瓜實(shí)蠅遺傳區(qū)性品系成蟲(chóng)腸道菌的影響及優(yōu)勢(shì)菌的利用研究初探.pdf

1、瓜實(shí)蠅Bactrocera cucurbitae(Coquillett)是重要的農(nóng)業(yè)害蟲(chóng)，生物防治實(shí)蠅技術(shù)—昆蟲(chóng)不育技術(shù)[Sterile Insect Technique(SIT)]已越來(lái)越受到國(guó)內(nèi)外農(nóng)業(yè)專(zhuān)家的青睞，而SIT中的輻照過(guò)程削弱了靶標(biāo)實(shí)蠅的體質(zhì)健康，關(guān)于這一方面的研究還鮮少有詳細(xì)的報(bào)道，本文研究了輻照對(duì)瓜實(shí)蠅遺傳區(qū)性品系[B.cucurbitae genetic sexing strain(GSS)]腸道菌的多樣性和相對(duì)豐度

2、的影響，并分離、鑒定和篩選優(yōu)勢(shì)菌屬飼喂蟲(chóng)源，在一定程度上降低了輻照的傷害。研究結(jié)果如下：
　　1、以100Gy137Cs輻照瓜實(shí)蠅遺傳區(qū)性品系的5、8、11和13日齡的雌、雄成蟲(chóng)，并采用基于16SrDNA的Illumina MiSeq測(cè)序技術(shù)分別對(duì)其腸道菌群進(jìn)行測(cè)序分析。結(jié)果表明從瓜實(shí)蠅雌、雄成蟲(chóng)腸道中共檢測(cè)到4個(gè)菌門(mén)和19個(gè)主要菌屬，其中變形菌門(mén)Proteobacteria（占總量的50％~98%）、厚壁菌門(mén)Firmicutes

3、（占總量的2%~47%）和普羅威登斯菌屬Providencia sp.、腸桿菌屬Enterobacter sp.分別是瓜實(shí)蠅GSS腸道中的優(yōu)勢(shì)菌門(mén)和菌屬；輻照顯著的減少了腸道中的微生物多樣性，降低了優(yōu)勢(shì)菌屬的相對(duì)豐度，這與瓜實(shí)蠅的性別和成蟲(chóng)日齡無(wú)關(guān)。
　　2、利用傳統(tǒng)的微生物分離技術(shù)從瓜實(shí)蠅雌、雄5日齡成蟲(chóng)腸道中共分離得到7種菌屬，分別為：腸桿菌屬（37%），普羅威登斯菌屬（18.5%），克雷伯氏菌屬Klebsiella sp.（

4、1.9%），芽孢桿菌屬Lysinibacillus sp.（1.9%），西地西菌屬Cedecea sp.（24%），Bacterium sp.（11.1%）和未知屬名的其他菌屬other（5.6%）。
　　3、利用腸桿菌屬作為瓜實(shí)蠅GSS幼蟲(chóng)飼料的添加劑，用活菌（PI）、死菌（API）分別作為兩個(gè)處理組，用無(wú)菌（NPI）作為對(duì)照，飼喂寄主至化蛹后，分別測(cè)定瓜實(shí)蠅GSS的生物學(xué)和形態(tài)學(xué)指標(biāo)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)活菌組能顯著的增加瓜實(shí)蠅GSS的蛹

5、重、頭寬和胸長(zhǎng)，而死菌和活菌組都能顯著的提高雌、雄成蟲(chóng)的耐壓存活率，它們提高的平均百分比分別是18%和4.72%（雌蟲(chóng)），15%和11%（雄蟲(chóng)）。因腸桿菌屬易分離和培養(yǎng)，在所分離的菌屬中所占比例最大，而應(yīng)用腸桿菌屬優(yōu)化幼蟲(chóng)飼料有顯著的效果，結(jié)果證明腸桿菌屬是瓜實(shí)蠅GSS腸道中的優(yōu)勢(shì)菌屬，也是強(qiáng)化幼蟲(chóng)飼料的益生菌屬。本研究成果將為未來(lái)開(kāi)發(fā)利用營(yíng)養(yǎng)菌作為瓜實(shí)蠅GSS幼蟲(chóng)飼料的添加劑，從而在一定程度上修復(fù)輻照的損傷提供理論依據(jù)，以期提高不育成