木香藥材中去氫木香內酯等活性成分提取分離及其衍生研究.pdf

1、木香作為傳統(tǒng)中藥，具有健胃消脹、調氣解郁、止痛安胎等作用?，F(xiàn)代研究表明其含有一些倍半萜類成分，其主要活性成分是去氫木香內酯與木香烯內酯，其具有抗腫瘤、抗菌、抗?jié)兊茸饔?。針對木香藥材活性成分的特點，本文對木香有效成分的提取分離和純化開展了較為系統(tǒng)的研究，對純化產物去氫木香內酯進行了衍生化研究及其衍生物抗腫瘤活性探索。相關研究為快速經濟提取分離得到木香中去氫木香內酯和木香烯內酯等活性成分可提供有效的工藝指導，并對木香藥材中藥用組分進行進一

2、步挖掘和新藥研發(fā)提供研究基礎和實驗數據支撐。
　　本文主要研究及工作結果如下：
　　對木香的提取方式，化學成分，藥理活性，衍生方式等進行了系統(tǒng)的文獻綜述和評價，在此基礎上提出并形成了本文的總體研究和技術實施方案。
　　以去氫木香內酯和木香烯內酯為指標成分，對比了溶劑提取法、水蒸氣蒸餾法、微波輔助提取法等方法對木香進行提取分離的效率，還對比了溶劑萃取和大孔樹脂吸附法分離低極性化合物的能力。研究表明：采用微波輔助提取法，在

3、微波400W功率，1：15的料液比條件下提取10min，每份提取3次，100g木香中提取得到去氫木香內酯和木香烯內酯量可達3.5g；采用AB-8型大孔樹脂分離木香甲醇提取液時，95％乙醇洗脫產物中去氫木香內酯和木香烯內酯的純度分別能達到43.1%和46.8%。
　　采用硅膠柱層析法、薄層層析法(TLC)和重結晶等技術，對木香的石油醚萃取層進行有效的分離純化，得到11個單體化合物；通過TLC、紅外、核磁等技術鑒定出7種單體成分，其分

4、別為土木香內酯、異土木香內酯、去氫木香內酯、木香烯內酯、豆甾醇、12-methoxydihydrocostunolid和孕甾烯醇酮。
　　采用高速逆流色譜（HSCCC）技術對木香的石油醚萃取層進行高效分離和純化。通過 HPLC測試去氫木香內酯和木香烯內酯在不同溶劑系統(tǒng)中的分配系數，結合分析型HSCCC分離效果，有效地指導HSCCC分離純化過程的溶劑選擇；通過正交實驗設計，選擇合理的轉數、流速和溶劑系統(tǒng)，提出HSCCC分離時的最佳條

5、件。實驗研究表明HSCCC分離制備去氫木香內酯和木香烯內酯的最佳條件為：石油醚-甲醇-水（5:7:3）溶劑系統(tǒng)，轉數為1000rpm，流速為3mL/min。該條件下總分離時間可以控制在150min內，去氫木香內酯和木香烯內酯的制備量一次都能達到140m g以上，為大量制備提供了較為快速有效的方法。提出測定溶劑系統(tǒng)分配系數時，不能片面采用 HPLC測試值，其并不能夠真實反映溶劑系統(tǒng)在制備型HSCCC中的真實分配情況，而只能顯示出一定的趨勢

6、，而分析型HSCCC則比較真實的反映出溶劑系統(tǒng)的真實分配情況。另外，通過HSCCC對石油醚萃取層的分離，得到了一個新化合物10-methoxy-artemisinic acid。
　　針對去氫木香內酯具有一定的抗腫瘤活性而卻有生物利用度低、活性不強等缺點，以提高其生物利用度和抗腫瘤活性為目標，對其進行結構修飾和衍生。針對去氫木香內酯的α-亞甲基-γ-內酯結構，根據邁克爾加成（Michael addition reaction）原理

7、，在其 C-13位加成不同基團結構，獲得系列衍生化合物。實驗完成了哌啶、嗎啉等7種衍生修飾反應，采用硅膠柱層析等技術分離得到單體衍生物，利用紅外、核磁等鑒定技術對其衍生物進行了結構鑒定。采用MTT法對去氫木香內酯的衍生物及去氫木香內酯和木香烯內酯進行初步抗腫瘤活性測試，結果顯示：4-羥基哌啶衍生物、嗎啉衍生物、吡咯烷衍生物、甲醇衍生物和二乙醇胺衍生物具有較明顯的抗腫瘤活性，且活性較去氫木香內酯有所提升，可作為一種候選藥物繼續(xù)進行深入研究