大鼠肺纖維化基因時空的表達及黃芪甲甙干預的研究.pdf

1、目的：使用大鼠表達譜芯片篩查肺纖維化以及應用黃芪甲甙干預治療后不同時空點異常表達的基因，闡明肺纖維化的致病機制和藥物作用的靶基因.
　　方法：用博萊霉素模型組7天和28天及應用黃芪甲甙干預28天的大鼠肺部標本，與安捷倫46000+大鼠基因芯片雜交。雜交后進行圖像掃描和數(shù)據(jù)分析。并使用real-time PCR對篩選的基因結果進行驗證。
　　結果：模型組28天對比7天共有2063個基因表達差異，篩選109個基因，43個上調，6

2、6個下調。黃芪甲甙28天組對比模型28天組4269個基因表達差異，篩選68個基因，45個上調，23個下調，應用GO分析和PATHEWAY分析顯示篩選出的基因涉及肺纖維化發(fā)生發(fā)展的各個方面。并選取其中的Timp1、Ltbp2、Fgf183個基因利用real-time PCR進行驗證，結果顯示這3個基因在3個標本中均有異常表達，驗證了基因芯片的結果。
　　結論：
　　1.博萊霉素致肺纖維化第7天主要為炎性和致纖維化基因的高表達，

3、第28天炎性和纖維化基因較第7天表達量減少。
　　2.病理切片和基因芯片結果顯示，黃芪甲甙對肺纖維化有明顯干預作用，其主要機制在于抗炎和減少致纖維化基因的表達。
　　3.選取Timp1（基質金屬蛋白酶抑制劑-1），F(xiàn)gf18（纖維生長因子-18），Ltbp2（轉化生長因子結合蛋白-2），3條基因進行Real-time PCR驗證，結果與基因芯片篩查結果一致，而且其表達量與芯片的ratio值顯著相關。表明利用基因芯片進行肺纖維