Fas-FasL基因在小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其與Bcl-2、細(xì)胞凋亡相關(guān)性的研究.pdf

1、中國(guó)醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文FasFasL基因在小細(xì)胞肺癌中的表達(dá)及其與Bcl2、細(xì)胞凋亡相關(guān)性的研究姓名：宿杰申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專(zhuān)業(yè)：外科學(xué)指導(dǎo)教師：陳東義20070301相近，低于正常肺的表達(dá)，且同樣主要位于細(xì)胞質(zhì)內(nèi)，而較少有細(xì)胞膜表達(dá)；肺癌細(xì)胞FasL陽(yáng)性表達(dá)率571％，明顯高于正常肺的表達(dá)，F(xiàn)asL表達(dá)陽(yáng)性肺癌的轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)其FasL表達(dá)結(jié)果全部陽(yáng)性，F(xiàn)asL表達(dá)陽(yáng)性率與TNM分期密切相關(guān)。推測(cè)FasL表達(dá)具有惡性較高的生物學(xué)行為，促

2、使腫瘤逃避機(jī)體免疫監(jiān)視。綜上所述，F(xiàn)as／FasL的異常表達(dá)或功能紊亂在肺癌細(xì)胞的凋亡、生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移和逃避免疫監(jiān)視等方面發(fā)揮著重要作用。目前國(guó)內(nèi)較少有關(guān)于小細(xì)胞肺癌Fas／FasL基因表達(dá)情況及其與凋亡關(guān)系的研究報(bào)道，國(guó)外也多限于tM細(xì)胞肺癌和小細(xì)胞肺癌細(xì)胞系的研究。所以進(jìn)一步深入研究Fas／FasL表達(dá)的調(diào)控機(jī)制及其介導(dǎo)的凋亡信號(hào)的傳導(dǎo)，將有助于明確Fas／FasL系統(tǒng)介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡在小細(xì)胞肺癌發(fā)生、發(fā)展中的意義。為肺癌的基因治療和免疫

3、治療提供新的方法和思路。方法l、實(shí)驗(yàn)材料選取中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第～醫(yī)院胸外科1998年1月一002年12月收治，術(shù)前未經(jīng)放療、化療，臨床隨訪資料完整，術(shù)后病理證實(shí)為小細(xì)胞肺癌共46例(為石蠟包埋組織標(biāo)本)，其中男26例，女20例，年齡2672歲，平均54歲，按照1997年國(guó)際抗癌聯(lián)盟TNM分期，I期14例，II期11例，Ⅲ期21例，癌旁5cm正常肺組織石蠟標(biāo)本20例。另選取2004年1月2006年6月手術(shù)的SCLC患者16例，其中男9例，

4、女7例，年齡3364歲，術(shù)前未經(jīng)化療或放療，切取瘤組織于14時(shí)內(nèi)放入液氮速凍，70℃冰箱保存。2、實(shí)驗(yàn)方法(1)PTPCR方法檢測(cè)Fas、FasLmRNA表達(dá)SCLC石蠟包埋標(biāo)本修塊，脫蠟后Trizol一步法提取總RNA，行逆轉(zhuǎn)錄及PCR反應(yīng)。反應(yīng)體系中加入2plMgCl2，10xRTBufferlpl，RNAse—free水375Itl，dNTPMixture(各10mM)l肛l，RNAse抑制劑0259l，AMV逆轉(zhuǎn)錄酶1O59l，