ACE基因I-D多態(tài)性和漢族人群急性肺損傷發(fā)生發(fā)展的相關(guān)研究.pdf

1、實(shí)驗(yàn)一：ACE基因I/D多態(tài)性和急性肺損傷發(fā)生及預(yù)后的關(guān)系
　　 目的：探討血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多態(tài)性和本地區(qū)漢族人群急性肺損傷(ALI)發(fā)生與預(yù)后之間的關(guān)系。方法：101例ALI患者、408例非ALI患者以及236例健康志愿者納入研究，PCR檢測(cè)研究對(duì)象的ACE基因I/D多態(tài)性。比較不同基因型(Ⅱ，ID，DD)和等位基因(I，D)分布頻率在三組間的差異。比較不同基因型ALI患者急性生理和慢性健康評(píng)

2、估(APACHE)Ⅱ評(píng)分、序貫器官衰竭評(píng)估(SOFA)評(píng)分、肺損傷評(píng)分、器官損傷數(shù)目、機(jī)械通氣時(shí)間、血管活性藥物使用時(shí)間、ICU住院時(shí)間以及28天病死率。檢測(cè)ALI患者血漿ACE活性及炎癥介質(zhì)白介素(IL)-6水平。結(jié)果：ACE基因三種基因型(Ⅱ，ID，DD)和等位基因(I，D)的分布頻率在ALI組、非ALI組及健康對(duì)照組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(DD型在三組的分布分別為：13.8％、10.1％、9.8％；D等位基因在三組的分布分別為：34.

3、2％、35.7％、32％)，P＞0.05。DD基因型ALI患者APACHEⅡ評(píng)分(19.7±8.7分)高于Ⅱ型(15.6±6.2分)，P＜0.05。在ALI不同基因型患者間，SOFA評(píng)分、肺損傷評(píng)分、器官損傷數(shù)目、機(jī)械通氣時(shí)間、血管活性藥物使用時(shí)間及ICU住院時(shí)間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Kaplan-Meier生存分析結(jié)果顯示DD型患者28天病死率為64.3％，顯著高于Ⅱ和ID兩組(分別為17.4％和26.8％)，P=0.013。不同ACE基

4、因型ALI患者血漿ACE活性和炎癥介質(zhì)IL-6水平組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)論：ACE基因I/D多態(tài)性與本地區(qū)漢族人群ALI易感性無(wú)顯著相關(guān)，但與ALI患者疾病嚴(yán)重程度及預(yù)后相關(guān)，DD型患者預(yù)后可能更差。
　　 實(shí)驗(yàn)二：I/D多態(tài)性對(duì)脂多糖刺激的單個(gè)核細(xì)胞ACE基因表達(dá)的影響
　　 目的：探討血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)基因插入/缺失(I/D)多態(tài)性對(duì)脂多糖(LPS)刺激的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)ACE基因表達(dá)影響。方法

5、：PCR檢測(cè)健康志愿者ACE基因I/D多態(tài)性。Ficoll密度梯度法提取不同ACE基因型健康者PBMC(Ⅱ型6例、ID型6例、DD型6例)，調(diào)整細(xì)胞數(shù)到1×106/ml，細(xì)胞混懸液1ml接種24孔細(xì)胞培養(yǎng)板，在LPS終濃度為0.1μg/ml干預(yù)下共培養(yǎng)。半定量RT-PCR法檢測(cè)培養(yǎng)6h細(xì)胞ACEmRNA表達(dá)量。比色法檢測(cè)培養(yǎng)24h細(xì)胞培養(yǎng)上清ACE活性。結(jié)果：在LPS刺激6h后，DD組PBMC ACE mRNA表達(dá)量為(30.55±13