異源雙鏈DNA體外錯配修復功能檢測模型的構建及彌漫性大B細胞性淋巴瘤中錯配修復系統(tǒng)的分析.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:噬菌體M13mp2特殊的生活史決定了每一種噬菌體有雙鏈和單鏈兩種DNA形式,以其為材料構建含有單堿基錯配的異源雙鏈DNA分子,用于檢測由hMSH2-hMSH6(hMutSα)識別錯配啟動的修復過程;以及含有雙堿基缺失的異源雙鏈DNA分子,用于檢測主要由hMSH2-hMSH3(hMutSβ)識別插入一缺失環(huán)(insertion-deletion loop, IDL)啟動的修復過程.以這兩種分子作為待修復模板;以TK6細胞株作為錯配修

2、復功能完整表型,以Lovo細胞株作為錯配修復功能缺陷表型,構建體外錯配修復(mismatch repair ,MMR)功能檢測模型.并使用診斷明確的遺傳性非腺瘤病性結直腸癌(herediary nonpolyposis colorectal cancer, HNPCC)及散發(fā)性大腸癌(sporadic colorectal cancer, SRC)評價該模型的檢測準確性和敏感性.模型穩(wěn)定后,將其應用于彌漫性大B細胞性淋巴瘤(diffus

3、e large B cell lymphoma, DLBCL),與其他的檢測手段一起共同探討MMR系統(tǒng)與DLBCL發(fā)病機制的相互關系.結論:以含有單堿基錯配和雙堿基缺失的異源雙鏈DNA分子為待修復模板,以細胞株TK6為錯配修復功能完整表型,以細胞株Lovo為錯配修復功能缺陷表型,在國內(nèi)首次建立體外錯配修復功能檢測模型.應用該模型檢測診斷明確的HNPCC和SRC病人腫瘤組織的MMR功能狀態(tài),其結果與各自不同的發(fā)病機制及微衛(wèi)星狀態(tài)一致,說明

4、該模型具有的檢測準確性和敏感性.同時也說明,國際HNPCC合作小組推薦的5個微衛(wèi)星位點具有較高的檢測敏感性,是臨床工作中首選的檢測手段;而對于家族史不明確,或微衛(wèi)星穩(wěn)定,而診斷存在困難的病例直接應用該模型進行MMR系統(tǒng)分析,可以提供一些有意義的線索.通過多種檢測手段對DLBCL的檢測發(fā)現(xiàn),由hMSH2-hMSH6(hMutSα)復合物識別單堿基錯配啟動的錯配修復功能的缺失可能在DLBCL發(fā)病中不起主要作用.而由hMSH2-hMSH3(h

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