亞甲基四氫葉酸還原酶和胸苷酸合成酶基因多態(tài)性的檢測及其意義研究.pdf

1、目的:了解潮汕地區(qū)健康漢族人群亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)677C>T和1298A>C和胸苷酸合成酶(TS)5’-非翻譯區(qū)(UTR)28bp重復序列3R/2R和3’-UTR6bp缺失或插入(6bp-/6bp+)單核苷酸多態(tài)性(SNPs)分布情況。
　　對象和方法:研究對象為100例健康潮汕地區(qū)漢族人群(男64例,女36例),四個位點突變基因采用聚合酶鏈式反應(PCR)和PCR-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RELP)方法檢測

2、。將獲得的結果與國內不同地區(qū)漢族和少數(shù)民族的資料比較,分析其在地域和民族分布特點。
　　結果:潮汕地區(qū)漢族人群MTHFR677CC、CT、TT基因型和677T等位基因頻率分別為65.0％、30.0%、5.0%和20.0%。1298AA、AC、CC基因型和1298C等位基因頻率分別為45.0%、50.0%、5.0%和30.0%。各基因型分布符合Hardy-Weinberg遺傳平衡。利用EH軟件構建677C-1298A、677C-12

3、98C和677T-1298A三種單倍體型,頻率分別為50.0%、30.0%和20.0%。兩位點間存在強連鎖不平衡(LD),︱D'︱=1.0。677T等位基因突變頻率和國內大部分南方漢族和少數(shù)民族接近,但顯著低于北方地區(qū)人群(p<0.05)。1298C突變位點頻率明顯高于北方地區(qū)人群,但低于南方的少數(shù)民族(p<0.05)。TS5’-UTR3R/3R、3R/2R和2R/2R基因型分布頻率為61.0%、36.0%和3.0%,3’-UTR6bp

4、-/6bp-、6bp-/6bp+和6bp+/6bp+基因型頻率分別為47.0%、42.0%和11.0%。各基因型分布也符合Hardy-Weinberg定律。5’-UTR2R和3’-UTR6bp+等位基因突變率分別為21.0%和32.0%。共構建四種單倍體型,LD分析提示存在強相關,︱D'︱=0.7。兩位點突變頻率和國內大部分地區(qū)漢族和少數(shù)民族頻率接近。
　　結論:潮汕地區(qū)漢族MTHFR677T和1298C突變率與文獻報道的我國南方

5、大部分地區(qū)漢族人群一致,和北方地區(qū)漢族人群及部分少數(shù)民族分布存在顯著差異性。顯示兩個位點具有明顯的地域和種族遺傳多態(tài)性。而該地區(qū)TS5’-UTR2R及3’-UTR6bp+突變頻率與國內其他地區(qū)漢族與少數(shù)民族接近,提示兩位點在中國人群的突變保持相對穩(wěn)定。
　　目的:通過了解與葉酸及 Hcy代謝相關的亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)677C>T、1298A>C和胸苷酸合成酶(TS)5’-UTR3R/2R、3’-UTR6bp-/6bp

6、+基因多態(tài)性在AS、RA患者和正常對照人群分布情況,探討上述基因突變位點與AS和RA發(fā)病易感性關系。
　　對象和方法:采用以醫(yī)院為基礎的病例對照研究,應用聚合酶鏈式反應(PCR)和PCR-限制性片段長度多態(tài)性(PCR-RELP)技術檢測114例AS患者,100例RA患者和100例正常對照四種基因多態(tài)性。
　　結果:MTHFR677C>T和1298A>C在AS和RA患者存在強連鎖不平衡(LD),D值分別為0.9和0.8;TS5

7、’-UTR3R/2R和3’-UTR6bp-/6bp+也存在強LD,D值分別為0.8和0.7。TS3’-UTR6bp-/6bp+基因型、6bp+等位基因和3R-6bp+單體型增加女性AS患者的發(fā)病風險,OR值分別為2.6(95%CI1.03~6.58),7.8(95%CI0.93~66.33)和3.0(95%CI1.0~9.0)。但由于納入研究的女性患者僅有10例,統(tǒng)計效能受到一定限制。本研究未觀察到MTFHR677C>T和1298A>C

8、多態(tài)性位點對AS發(fā)病的影響。在RA組,攜帶MTHFR677CT基因型者發(fā)病風險是CC基因型個體的2.69(95%CI1.48~4.89)倍。RA組677T等位基因突變頻率明顯高于對照組[33.5% vs.20.0%,OR=2.02(95%CI1.28~3.17)]。經(jīng)性別調整后分析,這種趨勢依然存在。在1298A>C位點,對照組AC、CC基因型和C等位基因突變頻率均高于RA組,但差異無統(tǒng)計學意義。兩位點的單體型分析提示677T-1298

9、A與RA發(fā)病風險增加有關,與677C-1298A單體型比較,OR=1.83(95%CI1.12~2.97)。TS基因多態(tài)性與降低RA發(fā)病風險有關,攜帶3R/2R基因型者發(fā)生RA的風險是3R/3R基因型者的0.50(95%CI0.26~0.93)倍。單體型分析結果提示2R-6bp+單倍體型可能是RA發(fā)病的一種保護因素,與攜帶3R-6bp-單體型個體比較,OR值為0.55,(95%CI0.31~0.99)。另外,本研究未能證實單獨TS3’-

10、UTR6bp-/6bp+位點與RA發(fā)病之間有統(tǒng)計學意義的關聯(lián)。
　　結論:MTHFR和TS基因多態(tài)性與RA發(fā)病存在關聯(lián),其變異可能是決定RA遺傳易感的因素。
　　目的:了解MTHFR677C>T,1298A>C和TS5’-UTR3R/2R,3’-UTR6bp-/6bp+基因多態(tài)性與甲氨蝶呤(MTX)治療類風濕關節(jié)炎(RA)、強直性脊柱炎(AS)療效和毒副作用的關系。
　　對象和方法:共有58例RA和62例AS納入療效評

11、價。85例RA和98例AS患者納入毒副作用評價。RA療效評價采用DAS28和修改的ACR20,AS療效評價采用ASAS20、50、70。詳細記錄患者服藥過程發(fā)生的毒副作用,副作用評價參照國家藥物不良反應監(jiān)測中心對藥物不良反應(adverse drug reaction,ADR)關聯(lián)性評價進行篩選。
　　結果:58例RA患者按DAS28(ESR)療效判定,療效好43例,療效差15例;按DAS28(CRP)評定,療效好40例,療效差1

12、8例;以ACR20進行療效評分,達到ACR20標準38例,未達該標準20例。未發(fā)現(xiàn)與RA療效關聯(lián)的基因多態(tài)性。62例AS患者,療效評價達ASAS70、ASAS50和ASAS20例數(shù)分別為12、17和22。治療未達ASAS20共11例?；蚨鄳B(tài)性在不同療效組間分布差異無統(tǒng)計學意義。183例接受小劑量MTX治療的RA和AS患者,其中67例發(fā)生藥物相關副作用(36.6%),未證實四個突變位點與毒副作用發(fā)生相關聯(lián)。
　　結論:我們初步的研