奶山羊干酪性淋巴結(jié)炎病原的分離鑒定及血清學(xué)調(diào)查.pdf

1、奶山羊規(guī)?；B(yǎng)殖已成為我國奶山羊產(chǎn)業(yè)的主要發(fā)展方向，由于羊奶價格的競爭優(yōu)勢，養(yǎng)殖奶山羊的地區(qū)也越來越多，如河南、黑龍江、福建、貴州等省份。在我國奶山羊主要養(yǎng)殖省份陜西和云南，規(guī)?；B(yǎng)殖已經(jīng)被養(yǎng)殖者普遍接受。但奶山羊傳染病至今仍是嚴重制約我國奶山羊產(chǎn)業(yè)規(guī)模化健康發(fā)展的主要因素之一，尤其是難以治愈的奶山羊干酪性淋巴結(jié)炎(又名山羊偽結(jié)核病，Caseous lymphadenitis(CLA))?；疾∧躺窖虿粌H出現(xiàn)體重下降、生產(chǎn)性能差、繁殖功能

2、障礙等疾病癥狀。尤為嚴重的是，泌乳羊乳汁中含有一定數(shù)量的病原菌，從而對喜食生羊乳的消費者健康造成巨大隱患。奶山羊干酪性淋巴結(jié)炎在我國各地很多養(yǎng)殖場都可看到，但更為準確地流行病學(xué)調(diào)查數(shù)據(jù)仍是空白，這也是本研究要解決的主要問題之一。
　　本研究選取陜西富、隴縣和云南瀘西的奶山羊養(yǎng)殖場，采集疑似山羊干酪性淋巴結(jié)炎病羊膿腫膿汁，采用細菌分離培養(yǎng)、顯微鏡觀察、生化試驗、協(xié)同溶血試驗、PCR、動物致病性試驗等方法對病原菌進行分離鑒定;采用間接

3、ELISA對采集的奶山羊血清進行CLA抗體測定。研究結(jié)果如下:
　　1.從陜西富平、隴縣和云南瀘西奶山羊羊群采集的樣品中共分離到3株菌株。分離菌株在普通瓊脂平板上生長貧瘠，形成灰白色、圓形、較干燥小菌落;麥康凱瓊脂平板上不生長。鮮血瓊脂平板上可見灰白色、不透明、同心圓狀、邊緣不齊、有狹窄β溶血環(huán)菌落，傳代后溶血現(xiàn)象消失。LB液體培養(yǎng)基中表面形成白色菌膜，管底有顆粒狀、絮狀沉淀。細菌鏡檢革蘭氏染色陽性，無莢膜，無芽孢，不運動，多呈棒

4、狀或球桿狀。細菌生化特性與《伯杰細菌鑒定手冊》所述偽結(jié)核棒狀桿菌生化特性基本一致。
　　2.在綿羊鮮血平板上，分離菌株能與馬紅球菌呈現(xiàn)特征性協(xié)同溶血現(xiàn)象。
　　3.分子生物學(xué)檢測顯示3株菌株與GenBank中已收錄的偽結(jié)核棒狀桿菌參考株親緣關(guān)系97％以上。
　　4.Balb/c小鼠致病性試驗和奶山羊回歸試驗證實分離菌株具有很強的致病性。
　　5.陜西富平、隴縣和云南瀘西3個地區(qū)奶山羊干酪性淋巴結(jié)炎血清抗體陽性率為

5、59.92％。其中，富平、隴縣和瀘西奶山羊干酪性淋巴結(jié)炎血清抗體陽性率分別為:71.50％、67.50％和25.47％;半放牧半舍飼養(yǎng)殖、集約化養(yǎng)殖和合作社養(yǎng)殖下奶山羊干酪性淋巴結(jié)炎血清抗體陽性率分別為:25.47％、67.66％和75％。
　　6.經(jīng)兩樣本百分數(shù)檢驗發(fā)現(xiàn):成年奶山羊比其他生理階段的山羊?qū)δ躺窖蚋衫倚粤馨徒Y(jié)炎更易感;與其他地區(qū)奶山羊相比，云南瀘西奶山羊?qū)ι窖蚋衫倚粤馨徒Y(jié)炎最不易感。在不同養(yǎng)殖模式下，合作社養(yǎng)殖奶山羊