補腎化瘀解毒方配合西藥治療慢性再生障礙性貧血的機理及臨床研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、本文對補腎化瘀解毒方配合西藥治療慢性再生障礙性貧血的機理及臨床價值進行了研究,全文分為兩部分: 第一部分,臨床研究目的:研究中藥復方補腎化瘀解毒方對慢性再生障礙性貧血的患者外周血象影響,觀察其臨床療效,以驗證脾腎兩虛為本,血瘀、熱毒為標的病機理論,并以此而立法組方的可行性和實用性。 研究方法:采用臨床對照法。納入標準為具有再障的臨床癥狀,血象及骨髓象符合慢性再生障礙性貧血的實驗室檢查(診斷標準參照1987年全國第四屆再生

2、障礙性貧血修訂的慢性再生障礙性貧血的診斷標準)。將所選病例,隨機分為中西醫(yī)結合治療組42例,西藥治療對照組29例。兩組一般情況無差異性。對照組服用康力龍、一葉秋堿。治療組在對照組用藥基礎上加用補腎化瘀解毒方(補骨脂、肉蓯蓉、熟地黃、菟絲子、黃芪、黨參、白術、山藥、當歸、丹參、玄參等)。兩組均3個月為一療程。病程中出現(xiàn)感染及嚴重出血時,給抗菌素、輸血和止血藥對癥處理,此外不用其它藥物,兩組所用藥物基本相似。觀察指標:①臨床癥狀改變。建立病

3、例、隨訪???,分別記錄治療前后頭暈乏力、面色蒼白、心悸氣短、腰酸乏力、皮膚瘀斑或瘀點,舌、脈等內(nèi)容。②血象改變。治療前由專業(yè)檢驗師采血取標本,根據(jù)血紅蛋白量分為輕、中、重度貧血,治療末進行復查,并進行統(tǒng)計分析。療效評定標準參照1987年全國第四屆再生障礙性貧血修訂的慢性再生障礙性貧血的療效標準。分基本治愈、緩解、明顯進步、無效。 研究結果:①血象改變。治療組與對照組比較,血紅蛋白含量于第1療程、第2療程后,均有顯著差異(P<0.

4、05)。白細胞計數(shù)、血小板計數(shù)在第1療程后,均無明顯差異(P>0.05),而在第2療程后兩組比較均有明顯差異(P<0.05和P<0.01)。②兩組臨床療效。治療組治療后總有效率88.1%,對照組總有效率72.41%。兩組比較P<0.05,治療組顯著優(yōu)于對照組。 研究結論:本研究表明,中藥復方補腎化瘀解毒方配合西藥治療慢性再生障礙性貧血能改善臨床癥狀,增加慢性再生障礙性貧血患者的血紅蛋白含量,提高白細胞、血小板計數(shù)。其療效優(yōu)于西藥

5、對照組。觀察結果,從臨床療效角度,證實了脾腎兩虛為本,血瘀、熱毒為標的病機理論和以此理論立法組方的補腎化瘀解毒方治療慢性再生障礙性貧血的可行性和實用性。且該方毒副作用小,是治療慢性再障的有效藥物,值得進一步研究開發(fā)。 第二部分,實驗研究目的:觀察補腎化瘀解毒方對再生障礙性貧血小鼠造血細胞的影響及免疫介導再生障礙性貧血小鼠免疫功能的影響,以探討補腎化瘀解毒方治療再生障礙性貧血的作用機理。 研究方法: 1.補腎化瘀解

6、毒方對再生障礙性貧血模型小鼠造血細胞的影響。選用12周齡昆明種小鼠(♀)60只,隨機分為5組,正常對照組(簡稱正常組)、再障模型組(簡稱模型組)、康力龍對照組(簡稱康力龍組)、補腎化瘀解毒方高劑量治療組(簡稱高劑量組)、補腎化瘀解毒方低劑量治療組(簡稱低劑量組)。除正常組外,其它各組小鼠采用腹腔注射馬利蘭15mg/kg,每周一次,連續(xù)10周。造模成功后,高劑量組給補腎化瘀解毒方40g/kg.d(相當于臨床用量的20倍),低劑量組給補腎化

7、瘀解毒方20g/kg.d(相當于臨床用量的10倍),康力龍組給康力龍4mg/kg.d,正常組、模型組予等量蒸餾水灌胃,每日一次,連續(xù)20天。給藥結束后禁食不禁水12小時,尾靜脈取血,計數(shù)紅細胞、白細胞、血小板,測血紅蛋白含量,同時,涂片染色后,計數(shù)網(wǎng)織紅細胞,觀察補腎化瘀解毒方對再障小鼠外周血的影響。然后斷頸處死,取小鼠右側股骨,用冰醋酸沖出骨髓細胞并計數(shù),觀察補腎化瘀解毒方對再障小鼠骨髓細胞的影響。 2.補腎化瘀解毒方對免疫介

8、導再生障礙性貧血模型小鼠免疫功能的影響。選用8-12周齡Balb/c小鼠40只(♀♂各半),隨機分為4組,正常組、模型組、補腎化瘀解毒方高劑量治療組(簡稱高劑量組)、補腎化瘀解毒方低劑量治療組(簡稱低劑量組)。用8-10周齡DBA/2小鼠6只,作為細胞供體。取DBA/2小鼠,斷頸處死,75%酒精浸泡消毒,無菌取出胸腺及頸部、腋下、腹股溝等處的淋巴結,放入1640培養(yǎng)液,除去表面血污及結締組織,再次清洗后,用剪刀反復剪切組織成糊狀,輕輕研

9、磨,用200目尼龍網(wǎng)過濾,使之成為單細胞懸液,計數(shù)后配成1×106/ml濃度,取苔盼藍1滴滴入玻片上鑒定細胞活性在95%以上。將模型組、高劑量組、低劑量組的Balb/c小鼠經(jīng)X射線6.0Gy/3min量照射后,1~4小時內(nèi)尾靜脈注入上述細胞懸液,每只0.2ml,免疫介導再障模型成功。高劑量組給補腎化瘀解毒方40g/kg.d,(相當于臨床用量的20倍),低劑量組給補腎化瘀解毒方20g/kg.d,(相當于臨床用量的10倍),正常組、模型組予

10、等量蒸餾水灌胃,每日一次,連續(xù)20天。給藥結束后禁食不禁水12小時,尾靜脈取血,觀察補腎化瘀解毒方對免疫介導再障小鼠外周血的影響。用放射免疫法檢測小鼠血清IL-2、TNF的水平。采用細胞毒法檢測小鼠脾臟T淋巴細胞百分比率。以觀察補腎化瘀解毒方對免疫介導再障模型小鼠的免疫調(diào)節(jié)作用。 研究結果: 1.補腎化瘀解毒方對再障小鼠外周血的影響,結果顯示:模型組小鼠RBC、WBC、Hb、Plt、RET計數(shù)較正常組有明顯降低(P<0.

11、05);給予康力龍和補腎化瘀解毒方治療后,WBC、RBC、Hb、Plt、RET均較模型組有升高,除低劑量組Hb無顯著升高外(P>0.05),其它均有顯著升高(P<0.05);高劑量組WBC、RBC升高與康力龍組比較差異無顯著性(P>0.05),Hb、Plt、RET與康力龍組比較有顯著升高(P<0.05);低劑量組WBC、RBC、Plt升高明顯低于康力龍組(P<0.05),而低劑量組Hb、RET與康力龍組比較兩組接近,差異無顯著性(P>0

12、.05);高劑量組與低劑量組比較WBC、RBC、Hb、Plt、RET各項指標均有顯著升高(P<0.05)。說明補腎化瘀解毒方有升高再障小鼠外周血各項指標的功能,且作用優(yōu)于康力龍,尤以高劑量組效果更佳。 2.補腎化瘀解毒方對再障模型小鼠骨髓有核細胞(MNC)計數(shù)的影響。結果顯示:再障模型小鼠MNC較正常組小鼠有明顯減少(P<0.05);康力龍組、補腎化瘀解毒方治療組與模型組比較MNC有顯著升高(P<0.05),其中高劑量治療組MN

13、C的升高與康力龍組比較無明顯差異(P>0.05);低劑量治療組MNC升高明顯低于康力龍組(P<0.05);高劑量組MNC升高明顯優(yōu)于低劑量組(P<0.05)。說明補腎化瘀解毒方有修復骨髓造血細胞損傷的作用,并促進其增殖、分化。且高劑量效果顯著。 3.補腎化瘀解毒方對免疫介導再障模型小鼠血清IL-2、TNF水平的影響,結果顯示:模型小鼠與正常小鼠比較IL-2、TNF含量有顯著升高(P<0.01)。應用補腎化瘀解毒方治療后,高、低劑

14、量組IL-2、TNF水平較模型組均有明顯降低(P<0.01);高、低劑量組間比較,IL-2含量以高劑量組下降更顯著(P<0.01),而TNF含量組間無顯著性差異(P>0.05)。說明補腎化瘀解毒方可通過抑制IL-2、TNF的表達起到免疫調(diào)節(jié)作用,并可解除其對骨髓造血的抑制作用。 4.補腎化瘀解毒方對免疫介導再障模型小鼠T細胞亞群的影響,結果顯示:模型組與正常組比較,TH細胞(輔助性T細胞、CD4)有顯著降低(P<0.01),Ts

15、細胞(抑制性T細胞、CD8)有明顯升高(P<0.01),TH/Ts比值明顯降低(P<0.01);高劑量組與模型組比較,TH細胞有顯著升高(P<0.01),Ts細胞有顯著降低(P<0.01),TH/Ts比值明顯升高(P<0.01);低劑量組與模型組比較TH細胞有升高的趨勢,但無顯著性差異(P>0.05),Ts細胞有顯著降低(P<0.01),TH/Ts比值明顯升高(P<0.01);高劑量與低劑量組間比較,TH有顯著升高(P<0.01),Ts

16、有顯著降低(P<0.01),TH/Ts比值明顯升高(P<0.01)。表明補腎化瘀解毒方有調(diào)節(jié)T細胞亞群平衡的作用,通過降低Ts細胞水平,升高TH細胞,調(diào)節(jié)TH/Ts比值,解除其對造血細胞功能的抑制作用,且以高劑量組效果更佳。 研究結論:本研究結果證實補腎化瘀解毒方對再障模型小鼠有治療作用,與臨床研究結果一致。表明補腎化瘀解毒方能升高再障模型小鼠外周血各項指標的數(shù)值,增加骨髓有核細胞數(shù),具有促進骨髓造血干細胞的修復、增殖作用,這可

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