白藜蘆醇抗糖尿病心肌病心肌纖維化作用及機制研究.pdf

1、目的:觀察白藜蘆醇(resveratrol，Res)對鏈脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）所致糖尿病心肌病心肌纖維化的作用并探討其可能機制。
　　 方法:雄性SD大鼠48只，隨機分為空白對照組（control，n=6），白藜蘆醇對照組（Res control，5mg/kg，n=6），STZ誘導模型組(M，n=12)，STZ誘導模型+白藜蘆醇低劑量組（M+ResL，5mg/kg，n=12），STZ誘導模型+白藜蘆醇高

2、劑量組(M+ResH，15mg/kg，n=12)。各糖尿病模型大鼠均給予STZ(65mg/kg)一次性腹腔注射造模，造模后第8d開始灌胃給藥8w。8w給藥結束后，所有大鼠禁食，測空腹血糖、體重及左心功能后，犧牲全部動物，取血檢測血清胰島素、糖化血紅蛋白;取胰腺做組織病理檢查;取左心稱重，并用HE染色、MASSON染色和電子透射電鏡行左心組織病理學檢查;用酶標儀行左心羥脯氨酸(hydroxyproline，Hyp)含量測定，RT-PCR檢

3、測左心蛋白激酶C(Protein kinase C，PKC)β2、轉化生長因子(Transforming GrowthFactor，TGF)β1、結締組織生長因子(Connective Tissue Growth Factor，CTGF)、纖維結合蛋白(Fibronectin，F(xiàn)N)、核因子(Nuclear factor, NF)κB、Smad2、核因子相關因子2(NF-E2-related factor2，Nrf2) mRNA表達，W

4、erstern Blot檢測左心TGF-β1、磷酸化Smad2、磷酸化NF-κB-p65及其抑制因子IκB-α蛋白表達。
　　 結果:與空白對照組比較，白藜蘆醇對照組大鼠胰島素水平升高（P＜0.01），Nrf2mRNA表達上調(P＜0.05)，其余指標無明顯變化。模型組大鼠除陸續(xù)有動物死亡外，動物體重、血清胰島素水平均顯著下降(P＜0.01)，空腹血糖和糖化血紅蛋白均顯著升高(P＜0.01)，光鏡下胰島萎縮、消失。模型組動物左心

5、舒縮功能顯著降低(P＜0.01)，心肌組織羥脯氨酸含量顯著增加(P＜0.01)，左心指數(shù)增大(P＜0.01)，光鏡下心肌細胞肥大、凝固性壞死及纖維增生，電鏡下心肌肌絲結構紊亂、線粒體腫脹、糖原顆粒沉積，同時，PKC-β2、TGF-β1、CTGF、FN、NF-κB、Smad2和Nrf2 mRNA表達上調(P＜0.01)，TGF-β1、磷酸化Smad2和磷酸化NF-κB-p65蛋白表達增多，IκB-α蛋白表達降低(P＜0.01)。與模型組大

6、鼠比較，給予Res干預后大鼠的死亡率降低，體重的下降趨勢減緩，血糖和糖化血紅蛋白水平降低(P＜0.05或P＜0.01)，胰島結構改善;左心肥大、心肌纖維化和線粒體損傷均較輕;心肌羥脯氨酸含量降低(P＜0.01);心臟舒縮功能得到改善(P＜0.05或P＜0.01);此外，白藜蘆醇對STZ所致的左心室PKC-β2、TGF-β1、CTGF、FN、NF-κB、Smad2 mRNA的高表達，TGF-β1、磷酸化NF-κB-p65、磷酸化Smad2