多西他賽對(duì)三陰性乳腺癌細(xì)胞株增殖影響及其機(jī)制的探討.pdf

1、目的：研究多西他賽對(duì)三陰性乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231增殖抑制作用，探討作用過(guò)程中與MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路的關(guān)系及相關(guān)機(jī)制。
　　方法：(1)1.25～20ug/mL多西他賽處理MDA-MB-231細(xì)胞24h、48h、72h，采用CCK-8試劑盒檢測(cè)多西他賽對(duì)MDA-MB-231細(xì)胞增殖的抑制作用;(2)倒置顯微鏡觀察腫瘤細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化;(3)流式細(xì)胞術(shù)(FCM)分析多西他賽作用后細(xì)胞周期分布及凋亡情況;(4)蛋白質(zhì)印跡法分別

2、檢測(cè)多西他賽處理后MAPK通路蛋白和凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax的表達(dá)。
　　結(jié)果：(1)1.25～20ug/mL多西他賽可抑制MDA-MB-231細(xì)胞增殖，呈濃度、時(shí)間依賴(lài)性，24h、48h、72h半數(shù)抑制濃度(IC50)為8.85、4.65、2.01ug/ml;(2)倒置顯微鏡觀察腫瘤細(xì)胞形態(tài)發(fā)生明顯改變，懸浮細(xì)胞增多;(3)流式細(xì)胞術(shù)分析可見(jiàn)，在多西他賽1.25和2.5ug/mL濃度下，停滯于G2/M期細(xì)胞百分率分別為(1

3、6.52±1.30)％和(29.15±0.54)％，明顯高于對(duì)照組的(6.53±0.59)％，P＜0.01;同時(shí)細(xì)胞凋亡率分別為（2.61±0.09）％和（3.15±0.07）％，明顯高于對(duì)照組的（0.42±0.02）％，P＜0.05;(4)蛋白質(zhì)印跡法結(jié)果顯示，多西他賽處理后，細(xì)胞p-ERK1/2蛋白的表達(dá)水平下降，p-JNK/SAPK蛋白的表達(dá)水平上升，而總ERK1/2、JNK/SAPK、P38及p-P38蛋白的表達(dá)水平無(wú)明顯變化;