腦靈湯對阿爾茨海默病模型大鼠海馬CA3區(qū)域Nogo-A和NgR表達變化的影響.pdf

1、背景和目的：阿爾茨海默病(Alzheimer’s disease，AD)是一種常見的中樞神經系統(tǒng)退行性病變，主要臨床表現為認知功能障礙、日常生活能力下降和精神行為癥狀等。其主要病理特征是老年斑(senileplaque，SP)、神經原纖維纏結(neurofibrillaryt angles，NFT)、選擇性神經元及突觸丟失。隨著我國人口的老齡化趨勢，AD發(fā)病率持續(xù)上升。研究發(fā)現65歲的老年人老年性癡呆的發(fā)病率為10％，而85歲以上者約達

2、30％。然而現代醫(yī)學對本病的防治研究至今尚未取得突破性進展。目前認為β-淀粉樣蛋白(Aβ)的沉積是AD的重要病因，可以通過多個環(huán)節(jié)在Alzheimer病中產生神經毒性作用。最近的研究發(fā)現，內質網膜蛋白(RTN)家族成員Nogo-A及其受體NgR也參與AD的病理過程。
　　 中醫(yī)藥對AD的防治具有多途徑和多靶點優(yōu)勢。中醫(yī)學認為老年性癡呆的病位在腦，與心、脾、腎等五臟功能失調、氣血精髓虧虛、氣血運行失調及痰濁淤血阻滯腦竅有著密切關系

3、，性質屬于本虛標實?；静C是髓減腦消，神經失用。其主要治則為補腎填精、理氣化痰和活血化瘀等。腦靈湯由何首烏、白參、紅景天等藥物配伍而成，具有補腎填精活血、益氣化痰開竅的功效。本文探討腦靈湯對阿爾茨海默病(AD)模型大鼠行為學、海馬組織形態(tài)學及海馬神經元Nogo-A蛋白和受體NgR表達的影響，揭示AD的部分發(fā)病機理和腦靈湯的作用機制，為指導臨床應用和開發(fā)新藥提供理論和實驗依據。
　　 方法：選用純系SD大鼠(雄性)30只隨機分為

4、5組，每組6只，分別為正常組、假手術組、模型組、中藥(腦靈湯)組和西藥(鹽酸多奈哌齊)組。喂養(yǎng)1周后，采用聚集態(tài)Aβ1-42、在大鼠雙側海馬注射建立AD模型。造模后喂養(yǎng)3周，采用Y-迷宮和Morris水迷宮檢測其行為學變化。取大鼠腦組織作冰凍切片，行改良剛果紅染色檢測海馬內Aβ的表達；HE染色觀察大鼠海馬組織形態(tài)學改變；用免疫組化法觀察Nogo-A蛋白及其受體(NgR)在大鼠海馬CA3區(qū)的表達變化。
　　 結果：1、Y-迷宮實驗

5、：與正常組相比較，模型組大鼠躲避至安全區(qū)所需電擊次數最多，有顯著性差異(P<0.05)。與模型組相比較，西藥組和中藥組躲避至安全區(qū)所需電擊次數明顯減少，比較有顯著差異(P<0.05)。中藥組和西藥組者相比，無顯著性差異(P>0.05)。2、Morris水迷宮實驗：①隱匿平臺搜索實驗中，模型組逃避潛伏期最長，與正常組比較有顯著性差異(P<0.05)；②探索實驗中，正常組和假手術組大鼠的平均穿越次數最多，西藥組和中藥組大鼠的穿越次數又多于模

6、型組，比較有顯著性差異(P<0.05)。3、剛果紅染色：模型組、中藥組和西藥組均有Aβ的沉積，但中藥組和西藥組較模型組明顯減少(P<0.05)。正常組和假手術組未見Aβ的沉積。4、HE染色：正常組和假手術組海馬CA3區(qū)錐體細胞排列整齊，無明顯神經元丟失；與正常組及假手術組比較，模型組大鼠海馬區(qū)神經元數目明顯減少，錐體細胞排列稀疏、紊亂，錐體細胞數目明顯減少(P<0.05)；中藥組和西藥組較模型組大鼠海馬區(qū)神經元數目相對增多，細胞排列較整

7、齊(P<0.05)。5、免疫組化：與正常組和假手術組比較，模型組大鼠海馬CA3區(qū)域Nogo-A陽性細胞數最多，NgR陽性細胞數最少，且中藥組和西藥組Nogo-A免疫陽性細胞數減少，但NgR陽性細胞數均增多，比較有有顯著性差異(P<0.05)。
　　 結論：(1)本實驗研究結果表明大鼠雙側海馬內注射Aβ1-42后模型大鼠出現了學習記憶功能障礙及AD病理改變，說明AD模型復制成功。(2)AD模型大鼠學習記憶能力明顯下降，腦靈湯可明顯