微滲透泵恒量灌注VEGF提高大鼠脂肪移植成活率的研究.pdf

1、【目的】 脂肪移植的高吸收率是脂肪移植最大的障礙，也一直是脂肪移植研究的重點(diǎn)。脂肪組織游離移植以后經(jīng)歷了缺血和血運(yùn)重建兩個(gè)過(guò)程，移植體與受區(qū)建立血液循環(huán)是組織存活的關(guān)鍵。血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是內(nèi)皮細(xì)胞的特異性絲裂原，可以促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖移行，促進(jìn)血管形成，同時(shí)對(duì)維持血管的正常狀態(tài)和完整性有重要意義。本實(shí)驗(yàn)在大鼠自體脂肪移植模型中，通過(guò)微滲透泵將VE

2、GF持續(xù)恒量地灌注到脂肪移植體中，探討VEGF對(duì)脂肪移植的血運(yùn)重建、脂肪成活率的影響，為臨床提高脂肪移植成活率提供理論依據(jù)。為解決了重組血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子代謝快、易吸收等問(wèn)題，本實(shí)驗(yàn)嘗試了微滲透泵緩釋VEGF的給藥途徑。 【方法】 健康SD大鼠90只隨機(jī)分成3組，每組30只。①手術(shù)對(duì)照組：?jiǎn)渭冃凶泽w脂肪移植；②實(shí)驗(yàn)對(duì)照組：自體脂肪移植后，微滲透泵持續(xù)恒量灌注2000μl生理鹽水；③實(shí)驗(yàn)組：自體脂肪移植，微滲透泵持續(xù)恒量

3、灌注含1μgVEGF的生理鹽水溶液20001μl。不同時(shí)間段取出脂肪移植體，用微刻度試管測(cè)量移植體剩余的體積；HE染色后光鏡下觀察移植體組織細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變；免疫組化法觀察實(shí)驗(yàn)組和各對(duì)照組脂肪移植體血管生長(zhǎng)情況，參照Weidner計(jì)數(shù)方法計(jì)算出每mlil<'2>面積內(nèi)微血管的量即血管密度，并求其均值。結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，分析通過(guò)應(yīng)用微滲透泵緩釋藥劑的情況下，局部應(yīng)用VEGF對(duì)脂肪移植體血管形成、組織成活率的影響，并探討其可能的機(jī)制。

4、 【結(jié)果】 1．光鏡下移植體形態(tài)比較各組移植體病理切片組織學(xué)特征相似：移植體外周為纖維包膜；中心為大片壞死的脂肪細(xì)胞；二者之間結(jié)構(gòu)復(fù)雜，主要為膠原纖維和囊樣空泡，兩者間可見(jiàn)壞死、趨于壞死以及散在的健康的脂肪細(xì)胞分布，健康脂肪細(xì)胞周?chē)Ｓ行⊙艽┻^(guò)。手術(shù)對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)對(duì)照組移植體纖維化明顯，脂肪組織存活量少，中央部可見(jiàn)較大區(qū)域壞死灶，移植體內(nèi)有大量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)；實(shí)驗(yàn)組移植脂肪組織存活量大，存活的脂肪細(xì)胞大小均一，纖維組織間隔少，部

5、分區(qū)域淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)。在各個(gè)時(shí)間段，不論移植體邊緣還是移植體中央部，實(shí)驗(yàn)組血管較手術(shù)對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)對(duì)照組血管為密集。 2．各時(shí)間段血管的密度比較實(shí)驗(yàn)組移植體外周和中央部均可見(jiàn)較多新生血管形成，外周為新生血管形成的“熱點(diǎn)”；手術(shù)對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)對(duì)照組新生血管數(shù)量較少，主要集中在移植體外周。實(shí)驗(yàn)組移植體新生血管密度高于手術(shù)對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)對(duì)照組(P<0.05)；手術(shù)對(duì)照組與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組間新生血管密度差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 3．

6、免疫組化法觀察移植體微血管的生長(zhǎng)情況對(duì)不同時(shí)間段脂肪移植體微血管進(jìn)行定量研究顯示，各組血管密度先逐漸增高，其后稍微下降。實(shí)驗(yàn)組于14天達(dá)最高，手術(shù)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)對(duì)照組于28天達(dá)最高。在同一時(shí)間段，實(shí)驗(yàn)組脂肪移植體新生血管密度均高于手術(shù)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)對(duì)照組。 4．移植體存活情況術(shù)后第7天，各組脂肪移植體存活體積無(wú)差別(P>0.05)。術(shù)后14天以后，實(shí)驗(yàn)組移植體脂肪組織存活體積高于手術(shù)對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)對(duì)照組(P<0.05)；手術(shù)對(duì)照組與實(shí)

7、驗(yàn)對(duì)照組脂肪組織存活體積差別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 【結(jié)論】 1．本實(shí)驗(yàn)結(jié)果支持1956年由Peer提出的細(xì)胞存活理論，移植體的組織成活與移植體血液循環(huán)重建密切相關(guān)。 2．VEGF 可以促進(jìn)移植體血管形成，并顯著提高移植體成活率。VEGF的有效劑量取決于移植脂肪的組織量，1ml脂肪顆粒中通過(guò)微滲透泵緩釋 1μgVEGF，可以起到有效作用。 3．VEGF提高脂肪移植成活率的可能機(jī)制主要包括：潛在的血