茅蒼術質量評價體系的建立與方法學研究.pdf

1、本論文以道地茅蒼術為基準，結合傳統(tǒng)用藥方式和臨床療效，采用現(xiàn)代分析技術分析其揮發(fā)性及水提物不同極性部位的化學成分，探討茅蒼術道地性的主要特征成分并與不同產地茅蒼術比較，結合植物化學方法和現(xiàn)代分析手段建立能夠較全面反映茅蒼術豐富化學信息的指紋圖譜，作為茅蒼術的質量評價和臨床療效的依據。主要研究內容和結論如下：
　　 1、采用柱層析和薄層跟蹤聯(lián)用的方法對茅蒼術揮發(fā)油中主要化學成分進行了分離，得到了6種化合物，經理化常數(shù)、光譜學方法鑒

2、定為蒼術酮、蒼術素、茅術醇、β-桉葉醇、白術內酯Ⅱ和乙酰蒼術素醇。并利用面積歸一化法進行純度檢查，6種化合物的純度均達98％以上。
　　 2、建立了氣相色譜法同時測定茅蒼術藥材中蒼術酮、蒼術素、茅術醇和β-桉葉醇含量的分析方法。方法學考察結果表明，方法準確、簡便，具有良好的重復性和穩(wěn)定性。15批不同產地茅蒼術藥材4種指標性成分含量測定結果顯示，道地茅蒼術藥材與非道地茅蒼術藥材揮發(fā)性成分的主要化學成分有較明顯的差別。SPSS聚類分

3、析顯示不同產地茅蒼術可分為2大類，道地產區(qū)可與江蘇南京靈山的和江蘇宜興的及湖北英山的聚為一類，安徽霍山、河南信陽和陜西的聚為一類。
　　 3、建立了GC-MS同時測定不同產地茅蒼術中13種倍半萜類和多炔類成分的含量的方法。所鑒定的13種化學成分定性結果準確、可靠。且本研究首次采用GC-MS分析方法對蒼術中白術內酯Ⅱ(Atractylenolide)、乙酰蒼術素醇(Acetylatractylodinol)進行了鑒定。對不同產地茅

4、蒼術中13種成分的含量進行了測定，結果表明不同產地茅蒼術藥材揮發(fā)性成分的組成及其含量有較明顯的差別。道地茅蒼術藥材所含化學成分種類較多；江蘇鎮(zhèn)江南山樣品與道地茅蒼術差別較小，安徽和湖北兩地樣品所含化學種類與道地樣品相似，但在含量方面存在一定的差異；河南和陜西蒼術樣品的化學組成較接近，但二者所含化學成分種類較少，其中茅術醇、β-桉葉醇兩種成分之和的含量較高，占所測13種成分總含量的87-65％～97.08％。分別以13種主要成分及4種特征

5、性成分(蒼術酮、茅術醇、β-桉葉醇、蒼術素)的GC-MS數(shù)據對19個樣品進行了SPSS聚類分析。分析結果表明，兩種聚類分析方式結果基本一致，19批不同產地樣品可分為兩大類，道地產區(qū)茅蒼術與江蘇鎮(zhèn)江南山、湖北英山、安徽毫州茅蒼術聚為一類，該類的特點是主要特征性成分為蒼術酮、茅術醇、β-桉葉醇、蒼術素，且蒼術酮與蒼術素含量之和較高；河南和陜西等地茅蒼術聚為另一類，該類的主要特點是樣品中茅術醇、β-桉葉醇含量較高，而樣品中蒼術酮含量較少或者未

6、檢出，蒼術素的含量也較低，因此該類樣品的特征性成分為茅術醇、β-桉葉醇。上述結果分析進一步表明蒼術酮、茅術醇、β-桉葉醇、蒼術素這四種成分可作為茅蒼術質量評價的揮發(fā)性指標成分。
　　 4、采用中藥指紋圖譜研究技術建立了不同產地的茅蒼術水提物不同極性部位的指紋圖譜。通過對不同產地茅蒼術水提物不同極性部位指紋圖譜的研究中發(fā)現(xiàn)，石油醚部位有10個主要共有峰，乙酸乙酯部位有11個主要共有峰，正丁醇部位有14個主要共有峰。綜合3個不同部位

7、的共有峰信息，能夠較全面的反映樣品的特征性。對不同產地16個茅蒼術樣品進行相似度計算，綜合分析16個樣品在不同極性部位相似度，結果表明6批道地茅蒼術的相似度較高，其他非道地茅蒼術與之相比相似度高低順序依次為：南京靈山、安徽、湖北、河南、陜西。對不同產地茅蒼術不同極性部位進行綜合SPSS聚類分析表明：道地茅蒼術、南京靈山茅蒼術與安徽、湖北產地茅蒼術聚為一大類，河南和陜西產地茅蒼術聚為另一大類。該聚類分析結果與以揮發(fā)性成分為指標的聚類分析結