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文檔簡介
1、研究目的:
本研究通過建立符合臨床的大鼠急性胰腺炎模型,同時采用藥物干預(yù)手段加以對照,旨在探討腎素血管緊張素醛固酮系統(tǒng)與胰腺局部組織微循環(huán)障礙的關(guān)系,探究血管緊張素受體拮抗劑對大鼠急性胰腺炎時胰腺組織的保護(hù)作用的相關(guān)分子生物學(xué)機(jī)制,為臨床急性胰腺炎的治療方案提供必要的實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
研究方法:
1.本研究采用腹腔局部注射雨蛙肽(caerulein,購自美國 Sigma公司)40μg/kg,間隔30min,共2次
2、,誘導(dǎo)Wistar大鼠的急性胰腺炎模型。
2.40只Wistar大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分組,分為對照組和急性胰腺炎(AP)組,AP組分為模型組(灌胃針灌注生理鹽水)和血管緊張素受體拮抗劑高中低劑量組(灌胃針灌注厄貝沙坦),共計5組,每組8只。
3.ELISA法測定用藥后12h血漿Ang-Ⅱ、碘-淀粉化學(xué)比色法測定用藥后12h血漿AMY水平,通過肉眼觀察記錄大鼠胰腺組織情況,同剖殺大鼠,取胰尾部胰腺組織用10%福馬林溶液固
3、定;石蠟包埋、切片;HE染色;通過顯微鏡觀察胰腺組織病理學(xué)改變及病理損傷程度。
4.采用異硫氰酸熒光素標(biāo)記紅細(xì)胞(FITC-RBC)技術(shù)及活體微循環(huán)觀測系統(tǒng)(BI-2000A)觀察大鼠胰腺微循環(huán)情況,通過專業(yè)圖像分析軟件分析統(tǒng)計,并計算胰腺微循環(huán)血液流速。
5.所有數(shù)據(jù)均采用spss13.0進(jìn)行統(tǒng)計描述與分析,定量資料符合正態(tài)分布用sx±進(jìn)行描述,兩組間比較用t檢驗(yàn),多組間比較用單因素方差分析,不符合正態(tài)分布,組間比
4、較用秩和檢驗(yàn),認(rèn)為P<0.05,差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
結(jié)果:
1.隨著模型組大鼠急性胰腺炎的進(jìn)展,AP組胰腺組織肉眼所見及顯微鏡病理示由水腫型向出血壞死發(fā)展,AngⅡ、AMY結(jié)果提示同步上升,胰腺局部組織血液流速降低。而對照組大鼠的胰腺組織大致正常。
2.顯微鏡觀察結(jié)果示:對照組大鼠胰腺組織鏡下可見部分間質(zhì)細(xì)胞水腫,伴有極少量的炎性細(xì)胞浸潤,無脂肪壞死、腺泡細(xì)胞壞死及炎癥等情況;中等劑量厄貝沙坦干預(yù)組大鼠胰腺
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