嶺南特色藥材廣陳皮化學成分及其質量評價研究.pdf

1、廣陳皮是我國嶺南傳統(tǒng)著名的道地藥材，位列十大廣藥之一?！吨腥A人民共和國藥典》（2005版)記載，陳皮藥材可分為陳皮及廣陳皮，質量以廣陳皮為優(yōu)，為蕓香科植物橘（Citrus reticulata Blanco)及其栽培變種的干燥成熟果皮。廣陳皮藥材來源較廣，正品為茶枝柑（Citrus reticulata‘Chachi’，當?shù)亟写蠹t柑)的干燥成熟果皮。主產(chǎn)于廣東新會，故又名新會陳皮，已有700多年的栽培歷史，主要含揮發(fā)油、黃酮類和部分生物

2、堿類成分。新會陳皮正宗，優(yōu)質，具有很高的藥用價值，如理氣健脾、和胃止嘔、燥濕化痰等，為歷代眾多名醫(yī)家所推崇，被奉為道地藥材。 目前，針對道地藥材廣陳皮所進行的系統(tǒng)科學研究不多，以物質基礎來說明其道地性特色的問題尤為突出。在質量評價方面，由于廣陳皮所含橙皮苷含量往往低于其它陳皮，參考陳皮僅以單一指標成分如橙皮苷（《中國藥典》2005版)來控制廣陳皮的質量已無法適應需要；另外，建立廣陳皮常規(guī)化學指紋圖譜又存在許多局限性，比如存在化學

3、成分不明及與療效不相關等問題，在物質基礎方面說明廣陳皮道地性的特色依然存在相當?shù)哪：浴?因此，本文通過采用常規(guī)分離手段并結合高速逆流色譜（high—speed countercurrent chromatography，HSCCC)技術針對廣陳皮化學成分進行了系統(tǒng)的提取分離研究。通過清除有機自由基DPPH法對分離得到的黃酮類成分進行了抗氧化活性評價。另外，結合前人的工作基礎，篩選出五種活性黃酮作為廣陳皮質量控制的指標成分，并以

4、此對廣陳皮的質量進行了全面科學的評價。最后，提出了廣陳皮“活性指紋圖譜”這一科學概念并進行了相關分析，以全面揭示其道地性特色的物質基礎。 本項目的實施，一方面可為廣陳皮藥材的質量標準化提供依據(jù)，有利于排除偽品，從而規(guī)范市場管理，促進廣陳皮產(chǎn)業(yè)化的健康發(fā)展；另一方面，是將我國傳統(tǒng)用藥經(jīng)驗與現(xiàn)代科學研究證明相結合的有益嘗試，為道地藥材的有效開發(fā)利用提供了一條新思路。 主要研究內容概述如下： （1)廣陳皮化學成分的系統(tǒng)

5、提取分離研究 采用常規(guī)的提取分離手段，從廣陳皮各部分萃取物中分離得到了17個化合物，經(jīng)理化鑒別，光譜解析（1H-NMR、13C-NMR、MS)鑒定了15個化合物的結構。其中正二十九烷酸、5-羥基-6，7，8，3’，4’-五甲氧基黃酮、胡蘿卜苷、阿魏酸、5-羥甲基糠醛、對羥基桂皮酸、橙皮素、果糖、新橙皮苷、蔗糖均為首次在該植物中分離得到。 （2)廣陳皮多甲氧基黃酮類成分高速逆流色譜法的制備分離研究 結合常規(guī)提取分離

6、方法，首次將高速逆流色譜法用于廣陳皮多甲氧基黃酮類成分的制備分離。該法避免了傳統(tǒng)柱層析分離方法存在的耗時長、步驟多、損失樣品大、得率低等缺點。本部分選擇黃酮類成分富集的石油醚、乙酸乙酯部位作為樣品，從兩部位中得到了高純度的單體化合物川陳皮素、3，5，6，7，8，3’，4’-七甲氧基黃酮、橘皮素、5羥基-6，7，8，3’，4’-五甲氧基黃酮、5，7，8，4’-四甲氧基黃酮。其中，3，5，6，7，8，37，4’-七甲氧基黃酮及5，7，8，4

7、'-四甲氧基黃酮采用常規(guī)分離方法未能得到。從實驗結果來看，高速逆流色譜法節(jié)約時間、節(jié)省溶劑，有利于短時間高純度、高得率產(chǎn)品的制備。 （3)廣陳皮黃酮類成分抗氧化活性評價 針對提取分離得到的廣陳皮各萃取部位及黃酮類單體成分，采用清除有機自由基DPPH法對其抗氧化能力進行了評價。研究結果表明，與陽性對照藥蘆丁、抗壞血酸及槲皮素相對比，廣陳皮各萃取部位（石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水萃取部位)均呈現(xiàn)出一定清除DPPH的能力，其中

8、乙酸乙酯部位能力較強；除橙皮素外，黃酮類各單體成分基本未能體現(xiàn)清除DPPH的能力。 （4)廣陳皮藥材的質量評價 結合文獻報道，選擇了五個活性黃酮類成分作為含量測定的指標成分。采用超聲方法提取藥材，對樣品粒度、溶劑倍量及超聲時間進行優(yōu)化，并對流動相系統(tǒng)、酸濃度及檢測波長進行篩選，確定了最佳樣品制備方法和色譜條件。該法簡單可靠、重現(xiàn)性好。采用建立的最佳色譜條件，分別對不同貯藏期、不同采收時間、不同產(chǎn)地廣陳皮及其它陳皮指標成分