缺氧對于大鼠原代支持細胞的損傷作用和機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:建立睪丸支持細胞體外缺氧模型,研究缺氧對于雄性生殖系統(tǒng)中支持細胞的活性和功能的影響,在此基礎之上進一步探討產(chǎn)生活性和功能影響的可能機制,并尋找能夠減緩缺氧損傷的保護劑。
　　方法:在睪丸支持細胞體外缺氧模型的基礎之上,利用CoCl2作為體外缺氧模型的模擬劑。模擬支持細胞的缺氧環(huán)境,采用MTT和流式細胞儀檢測缺氧狀態(tài)下支持細胞的活性和凋亡率。并利用CoCl2模擬不同濃度下的支持細胞活性變化,檢測細胞活性是否存在劑量依賴性和時間

2、依賴性。利用實時定量熒光PCR檢測支持細胞凋亡情況,Westernblot檢測凋亡效應分子caspase-3的變化。Real-timePCR檢測支持細胞的分泌功能。
　　結(jié)果:成功建立體外缺氧模型,支持細胞形態(tài)改變,細胞發(fā)生皺縮,體積縮小。發(fā)現(xiàn)CoCl2誘導缺氧能降低支持細胞活性存在濃度依賴性,但是不具備時間依賴性。同樣對于支持細胞凋亡也存在濃度依賴性,而且也具備時間依賴性。CoCl2誘導缺氧能夠通過氧化應激引起依賴線粒體的凋亡途

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