Treg細胞在梅毒血清固定現(xiàn)象形成中作用的研究.pdf

1、目的：探討外周血CD4+CD25+調節(jié)性T細胞(regulatory T cells，Tregs)在梅毒血清固定現(xiàn)象形成中的作用。
　　方法：從整體、細胞、分子水平三個層面探討CD4+CD25+Treg細胞在梅毒血清固定現(xiàn)象形成中的作用。整體水平：采用經(jīng)流式細胞術(flow cytometry，F(xiàn)CM)檢測28例血清固定梅毒患者和28例正常獻血者外周血的Treg細胞比例；細胞水平：選擇4例血清固定梅毒患者和4例正常獻血者，按1個患

2、者與1個正常獻血者配組，共4個配對組，用免疫磁珠細胞分選技術(magnetic activationcell sorting，MACS)分選出高純度的CD4+CD25+Treg細胞和CD4+CD25-細胞，按配對組逐一進行單獨、混合培養(yǎng)(按1:1)，并采用BrdU摻入法評價Treg細胞體外抑制功能；分子水平：用Realtime-PCR及流式細胞蛋白定量技術檢測Treg細胞叉狀頭/翅膀狀螺旋轉錄因子3(forkhead/twinged h

3、elix ranscriptionfactor3，F(xiàn)OXP3)、細胞毒性T細胞相關抗原-4(cytotoxic T lymphocyteantigen-4，CTLA-4)和白介素-10(interleukin-10，IL-10)的mRNA及蛋白(protein，Pr)表達水平；最后血清梅毒固定患者組的外周血Treg細胞比例和相關細胞因子mRNA及蛋白表達水平與快速血漿反應素環(huán)狀卡片試驗(rapid plasmareagin circle

4、 card test，RPR)結果作相關分析。
　　結果：1.整體水平：血清固定梅毒患者外周血CD4+CD25+FOXP3+細胞、CD4+CD25+CTLA-4+細胞及CD4+CD25+IL-10+細胞比例較正常對照組顯著升高(P均(0.01)；2.細胞水平：體外細胞培養(yǎng)，加入CD4+CD25+Treg細胞后CD4+CD25-細胞增殖能力明顯受到抑制，并且來自患者組的CD4+CD25+Treg細胞抑制效率明顯高于來自對照組；3.分

5、子水平：血清固定梅毒患者組外周血CD4+CD25+Treg細胞相關細胞因子FOXP3、CTLA-4和IL-10的mRNA表達水平均比正常對照組明顯增高(P分別為<0.01、<0.05及<0.01)，CD4+CD25+細胞相關細胞因子FOXP3、CTLA-4、IL-10蛋白分子表達量明顯也較正常對照組顯著升高(P均<0.01)。4.血清固定梅毒患者組外周血Treg細胞比例和相關細胞因子FOXP3、CTLA-4、IL-10mRNA及蛋白表達