香菇多糖對急性髓系白血病患者樹突狀細胞的成熟和功能影響的體內外研究.pdf

1、目的：通過體內外試驗研究香菇多糖(lentinan，LNT)對急性髓系白血病(AML)患者樹突狀細胞(DC)的促成熟及功能調節(jié)的機制，進一步闡明香菇多糖的免疫學活性，并探索白血病免疫治療的新途徑。
　　 方法：體外試驗用Ficoll密度梯度離心法分離急性髓系白血病完全緩解期(AML-CR)患者的骨髓單個核細胞(BMNC)用含重組人粒-巨噬細胞集落刺激因子(rhGM-CSF)1000U/ml和重組人白細胞介素4(rhIL-4)50

2、0U/ml的RPMI-1640完全培養(yǎng)基在37℃5％CO2孵箱中培養(yǎng)至第7天。陽性對照組加常規(guī)量的脂多糖(LPS)，實驗組分別用LNT1ug、3ug、5ug刺激DC，陰性對照組加相同體積的培養(yǎng)液，培養(yǎng)48小時后；經(jīng)形態(tài)學觀察(倒置顯微鏡、Wright-Giemsa染色)，免疫學(CD80、CD83、CD86、CD1a、HLA-DR)的鑒定，ELISA雙抗體夾心法檢測DCs上清液白細胞介素12(IL-12)的水平。體內試驗用免疫磁珠法(M

3、ACS)分離AML-CR患者經(jīng)LNT治療前、后的外周血單個核細胞(PBMNC)的DCs；ELISA雙抗體夾心法檢測DCs上清液IL-12的水平。
　　 結果：體外試驗，高劑量組LNT作用的DC呈典型形態(tài)；能夠提高DC表面分子CD80、CD83、CD86、CD1a及HLA-DR的表達(P＜0.05)；DC分泌IL-12較陰性對照組顯著增高(P＜0.05)，且呈LNT濃度依賴性。體內試驗，經(jīng)LNT治療后分離純化的DC分泌IL-12的