吉富羅非魚感染無乳鏈球菌后的病理觀察及免疫酶活性變化研究.pdf

1、羅非魚是中國淡水養(yǎng)殖的重要品種，主要在廣東、海南、廣西、云南及福建等省份養(yǎng)殖。近年來由于規(guī)模化養(yǎng)殖模式的推廣和養(yǎng)殖環(huán)境惡化，導致病害頻發(fā)，其中以無乳鏈球菌病的危害最大。目前尚無報道羅非魚感染無乳鏈球菌的途徑及侵染靶器官。開展羅非魚感染無乳鏈球菌后的動態(tài)病理學及免疫酶活性變化研究工作，可以為更深入研究無乳鏈球菌的致病機理和防控藥物研發(fā)提供理論依據(jù)。本研究采用注射、灌胃、浸泡三種方式對吉富羅非魚進行無乳鏈球菌(HN016菌株)感染，觀察三種

2、方式感染后病原菌在吉富羅非魚體內的分布規(guī)律及病理變化，同時研究不同種群羅非魚感染無乳鏈球菌后血液及肝臟組織中免疫相關酶的變化規(guī)律。主要結論如下:(1)采用注射、灌胃、浸泡三種方式對吉富羅非魚進行人工感染，其中注射和灌胃均出現(xiàn)典型的無乳鏈球菌病臨床癥狀，注射組的死亡周期最短，感染后12h出現(xiàn)死魚，感染后24h出現(xiàn)死亡高峰，死亡率最高，達到92.5％;灌胃組感染后5h出現(xiàn)死魚，感染后48h出現(xiàn)死亡高峰，死亡率為90％;而浸泡組感染后僅出現(xiàn)輕

3、微發(fā)病癥狀，沒有出現(xiàn)死魚。(2)在吉富羅非魚感染無乳鏈球菌后體內病原菌分離方面，注射組和灌胃組感染后2h在脾臟、肝臟、前腎、胃、腮、皮膚和肌肉組織中均可分離出病原菌，感染后5h在兩組的腦組織中均可分離出病原菌，感染后8h兩組均已表現(xiàn)出明顯的發(fā)病癥狀，此時體內各組織的病原菌濃度達到峰值;而浸泡組感染后8h才在體內各組織中分離出病原菌，但它們的濃度均低于相同時期的注射組和灌胃組。(3)對吉富羅非魚進行注射、灌胃、浸泡三種方式感染無乳鏈球菌，

4、取感染后2h、5h、8h、12h、24h的鰓、腸、脾臟、肝臟組織進行蘇木精-伊紅染色法（H.E染色法）染色及免疫組織化學定位。H.E染色結果顯示:三種方式在感染后早期(2-5h)鰓、肝臟、脾臟、腸組織均已經出現(xiàn)明顯病變，其中鰓表現(xiàn)為基部上皮細胞增生及鰓小片壞死，脾臟為含鐵血黃素增多、巨噬細胞彌漫性浸潤以及血管變細，肝臟為出現(xiàn)空泡變性、毛細血管破裂，腸為腸絨毛斷裂、黏膜下層細胞結構被破壞;三種方式的病變程度依次為注射組＞灌胃組＞浸泡組。免

5、疫組化定位結果顯示:灌胃感染后病原菌強陽性信號先在腸組織出現(xiàn)，注射組為脾臟組織，浸泡組為鰓組織。(4)采用腹腔注射方式對吉富羅非魚抗病選育系、百桂品系吉富羅非魚及奧尼羅非魚感染無乳鏈球菌（HN016菌株），分析感染后三種羅非魚血液及肝臟中超氧化物歧化酶(SOD)、酸性磷酸酶(ACP)、堿性磷酸酶(AKP)、溶菌酶(LZM)、總抗氧化能力(T-AOC)等免疫相關酶活性變化。結果顯示:三個不同種群羅非魚肝臟組織ACP、AKP、LZM、SOD