調(diào)節(jié)性T細胞在原發(fā)性肝癌免疫逃逸中的作用初探.pdf

1、以往的研究已表明：癌癥患者在腫瘤局部和全身的免疫功能都處于耐受或缺陷狀態(tài)，腫瘤必需在逃逸機體的免疫監(jiān)控之后才得以發(fā)展。調(diào)節(jié)性T細胞是一類具有免疫調(diào)節(jié)功能的T淋巴細胞亞群，這類細胞具有很強的免疫抑制功能，從而在腫瘤免疫逃逸中起著十分重要的作用。雖然調(diào)節(jié)性T細胞有多種類型，但是經(jīng)典的CD4+CD25+FoxP3+調(diào)節(jié)性T細胞(簡稱Treg細胞)是其中最主要的一群細胞。本研究以原發(fā)性肝細胞肝癌(簡稱肝癌)這一本地區(qū)高發(fā)的惡性腫瘤為研究模型，通

2、過檢測肝癌患者外周血和腫瘤局部Treg細胞的數(shù)量、分布、表型及其抑制免疫的能力，同時結(jié)合體外模擬腫瘤微環(huán)境來進一步探究Treg細胞在腫瘤部位聚集的機制，來揭示Treg細胞在肝癌免疫逃逸中的作用和機制。研究結(jié)果表明，肝癌患者外周血中的Treg細胞的比例明顯高于健康人外周血，而在同一患者中腫瘤組織中的Treg細胞比例也確實比對應(yīng)的癌旁組織或正常肝臟中高的多。而且，患者腫瘤組織中的Treg細胞具有更顯著的免疫抑制表型，在經(jīng)分離培養(yǎng)后能抑制肝癌

3、組織中的CD4+CD25-T細胞的增殖和激活。與這一結(jié)果相應(yīng)的是，腫瘤組織中CD8+T細胞和CD56+ NK細胞大多處于免疫耐受狀態(tài)。免疫組化檢測肝癌組織中Treg細胞數(shù)量的結(jié)果表明：在經(jīng)施行根治性肝切除術(shù)后的患者癌巢中Treg細胞的數(shù)量與其術(shù)后的預(yù)后生存成負相關(guān)，并可以作為一個獨立的預(yù)后判斷指標。重要的是，我們還發(fā)現(xiàn)腫瘤臨床分級、癌巢中巨噬細胞的數(shù)量與Treg細胞的數(shù)量成正相關(guān)。小鼠模型的研究結(jié)果證明了去除肝內(nèi)巨噬細胞能抑制由于接種肝

4、癌引起的Treg細胞比例的上調(diào)。體外實驗表明肝癌細胞株培養(yǎng)上清與PBMC共培養(yǎng)能引起Treg細胞比例的上調(diào)。此外，我們利用已建立的模擬腫瘤微環(huán)境的體外模型，在正常人外周血單核細胞向巨噬細胞分化的過程中加入肝癌細胞株培養(yǎng)上清，再將后者與自體淋巴細胞共培養(yǎng)，也能夠引起Treg細胞比例的升高，同時也發(fā)現(xiàn)IL-10參與了這一過程。我們實驗室在前期研究中發(fā)現(xiàn)：用肝癌細胞株上清誘導(dǎo)單核細胞分化成的巨噬細胞以及體內(nèi)癌巢部位的巨噬細胞都能產(chǎn)生IL-10

5、。這些結(jié)果提示腫瘤相關(guān)巨噬細胞能通過IL-10引起局部Treg細胞比例的升高。鑒于調(diào)節(jié)性T細胞在肝癌免疫逃逸中所起的重要作用，我們對細胞因子誘導(dǎo)的殺傷(CIK)細胞在回輸前進行質(zhì)量監(jiān)測時觀察了FoxP3+細胞表達的情況，在多批次細胞中發(fā)現(xiàn)含有較高比例的FoxP3+細胞，因此，我們通過優(yōu)化培養(yǎng)條件，降低了FoxP3+細胞的數(shù)量，為今后的臨床研究作好準備。上述結(jié)果提示，Treg細胞在原發(fā)性肝癌免疫逃逸中發(fā)揮了重要的作用，在作為針對肝癌的治療