MCF-7荷瘤小鼠不同樹突狀細胞亞群凋亡的研究.pdf

1、南方醫(yī)科大學2009級博士學位論文MCF7荷瘤小鼠不同樹突狀細胞亞群凋亡的研究ApoptosisofDendriticCellSubsetsinMCF7Tumor—bearingMice課題來源：自選專業(yè)名稱學位申請人指導教師答辯委員會主席答辯委員會成員腫瘤學張還珠羅榮城教授陳尊器教授陳運賢教授周杰教授張為民教授郭亞兵教授劉魁鳳教授袁亞維教授論文評閱人陳運賢教授周杰教授郭亞兵教授2012年5月3日廣州摘要的免疫治療方法和新的疫苗的提供基

2、礎信息。方法1取對數(shù)生長期MCF7細胞調(diào)整細胞濃度為1x107／ml，用于以下實驗。220只5周齡無特定病原體(SPF)級BALB／C雌性裸鼠，隨機分為2組，用lml注射器向荷瘤組小鼠右側胸壁第二對乳腺脂肪墊注入02mL上述MCF7細胞懸液，對照組注入02mL無血清培養(yǎng)基。待腫塊直徑達5mm后處死小鼠。3取小鼠骨髓單個核細胞，RPMll640(10％FBS)培養(yǎng)基調(diào)整細胞濃度為107／15ml，每llll(60mm))hn入15ml細胞

3、懸液，再加入15mlRPMll640隔3天更換1次培養(yǎng)液。第3天吸棄全部培養(yǎng)基及懸浮細胞，加入含100ng／mlrmGMCSF100ng／mlrmlL4的上述培養(yǎng)基共孵育，第7天更換培養(yǎng)基時補加脂多糖100ng／mL共孵育，第8天吹打疏松貼壁的增殖性細胞聚集體，次日收集懸浮的細胞即為富集的DCs。相差顯微鏡下觀察細胞形態(tài)特點。收集細胞做以下實驗。4用PBS(含I％FBS)調(diào)整細胞濃度為106／100d，每流式管加入100ul細胞懸液，再

4、加入lug／管相應熒光素偶聯(lián)一抗，上機檢測。5荷瘤小鼠乳房腫塊病理免疫組化檢測：supervision二步法檢測ER、PR、CerbB2、Ki67。6統(tǒng)計學方法：計量資料統(tǒng)計描述用均數(shù)4標準差表示，兩組均數(shù)比較用獨立樣本t檢驗。檢驗水準u=005。結果1對數(shù)生長期MCF7細胞倒置顯微鏡下觀察，貼壁生長，形態(tài)良好、折光性強。2荷瘤組小鼠在注射MCF7后第16天乳腺腫塊達5mm或以上。荷瘤組和對照組小鼠體重在荷瘤前及荷瘤后均無統(tǒng)計學差異，具