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文檔簡介
1、本文分析了妊娠期高糖飲食對子代學習記憶及海馬神經細胞凋亡的影響。本研究分為兩個部分:
第一部分:
目的:妊娠期高糖飲食不利于胎兒及子代的正常生長和器官發(fā)育,并可能引起一定的功能改變。本實驗著眼于研究妊娠期高糖飲食對子代腦發(fā)育的影響,并進一步探究其子代腦功能,如學習記憶能力是否改變。
方法:采用本實驗室已建立成熟的妊娠期高糖飲食模型,將懷孕母鼠隨機分為妊娠期高糖飲食組(高糖組,HS)和正常飲食組(對照組,C)
2、。高糖組母鼠妊娠期全程(第1-21天)給予20%蔗糖水和正常標準飼料,對照組母鼠妊娠期全程給予正常飼料和淡水。出生后子代鼠均給予標準化飼料和淡水。監(jiān)測孕鼠在妊娠期的飲水飲食及體重變化;于妊娠第21天檢測孕鼠空腹血糖、羊水含糖量及胎鼠血糖,子代大鼠標準化飼養(yǎng),檢測1月齡及2月齡大鼠空腹血糖;分別稱量胎鼠、1月齡及2月齡子代鼠的體重、腦重,并計算腦/體重比值;采用Morris水迷宮實驗檢測1月齡及2月齡子代大鼠的空間學習記憶能力。
3、 結果:高糖組母鼠在妊娠期的飲水飲食及體重增長與對照組相比均無明顯差異;妊娠第21天,高糖組孕鼠的空腹血糖顯著高于對照組,羊水含糖量在兩組間無統(tǒng)計學差異,高糖組胎鼠、1月齡及2月齡子代鼠的空腹血糖均顯著高于對照組;高糖組2月齡子代鼠腦重顯著下降,胎鼠、1月齡及2月齡子代鼠的腦/體重比值均顯著低于對照組,而體重均顯著升高;Morris水迷宮訓練結果顯示,暴露于妊娠期高糖飲食的子代大鼠在定位航行實驗中需要更長的時間和游更長的距離才能找到平臺
4、,兩組大鼠在空間搜索實驗中的穿越平臺次數及目標象限停留時間均無統(tǒng)計學差異。
結論:妊娠期高糖飲食對胎兒及子代的生長和腦發(fā)育具有一定影響,該影響在子代中可表現為學習記憶能力的下降。
第二部分:
目的:通過組織學及分子生物學手段,研究妊娠期高糖飲食對子代海馬腦區(qū)神經元凋亡的影響,并進一步探究其可能的機制。
方法:妊娠期高糖飲食模型的建立同第一部分;取2月齡子代大鼠的新鮮腦組織進行冰凍切片,采用一步法T
5、UNEL染色檢測兩組大鼠海馬腦區(qū)(CA1,CA2, CA3)的細胞凋亡,并于熒光顯微鏡下記錄兩組切片陽性染色細胞數;以Western blotting法檢測兩組2月齡子代大鼠海馬組織內凋亡相關蛋白(IGF-1,PI3K,Akt, p-Akt,caspase-3,Bcl-2,NR2B)的表達。
結果:組織學染色結果顯示,與對照組相比,高糖組2月齡子代大鼠海馬CA1, CA2,CA3區(qū)域的TUNEL染色陽性細胞數均顯著增加;Wes
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