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文檔簡介
1、基因治療(Gene therapy)在治療先天基因缺陷以及獲得性疾病方面展現(xiàn)出巨大的潛力。基因治療依賴于安全高效的基因載體,基因載體通常分為病毒性載體和非病毒性載體兩大類。兩者相比,非病毒性基因載體無傳染性,載體容量大,結(jié)構(gòu)容易控制,適合大規(guī)模生產(chǎn),毒性低、免疫反應(yīng)低,但是現(xiàn)有的基因載體轉(zhuǎn)染效率還不夠理想。因此,發(fā)展安全高效的非病毒性載體仍面臨著挑戰(zhàn)。
天然多糖可再生,生物相容性良好,基于多糖構(gòu)建基因載體是設(shè)計安全高效載體的一
2、種有效手段。聚天冬氨酸(Poly(aspartic acid))毒性低,生物相容性好,易生物降解,是制備基因載體的理想材料。本文研究內(nèi)容如下:
1、我們首先以環(huán)糊精(Cyclodextrin,CD)、葡聚糖(Dextran)和殼聚糖(Chitosan,CS)為代表探究了一種多糖接枝聚天冬氨酸的普適性方法。以乙二胺(Ethylene diamine,ED)修飾的CD和Dextran以及本身含有-NH2的CS為引發(fā)劑,引發(fā)單體天冬
3、氨酸-β-芐酯-N-羰基內(nèi)酸酐(BLA-NCA)的開環(huán)聚合反應(yīng)得到多糖接枝聚天冬氨酸芐酯聚合物(Polysaccharide-PBLA),再通過ED與Polysaccharide-PBLA上芐基的胺解反應(yīng)構(gòu)建了一系列基因載體(Polysaccharide-PAsp-ED)。通過降解,細(xì)胞毒性,海腎熒光素酶等實驗證明Polysaccharide-PAsp-ED具有良好的降解性,較低的毒性,尤其是基于殼聚糖的基因載體具有較優(yōu)異的轉(zhuǎn)染效率。<
4、br> 2、為進(jìn)一步提高基因載體的轉(zhuǎn)染效率,構(gòu)建具有靶向性的基因載體,我們又進(jìn)行了下面的課題。在CS上引入了CD,形成CS-CD多糖骨架,以通過ED修飾的CS-CD為引發(fā)劑,引發(fā)單體BLA-NCA的開環(huán)聚合反應(yīng),得到CS-CD-PBLA,通過與ED的胺解反應(yīng),得到陽離子聚合物CS-CD-PAsp-ED(CCPE)。通過接有葉酸(Folic acid,F(xiàn)A)的金剛烷胺(Adamantanamine,Ad)與CD空腔之間的自組裝賦予陽離子
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