豬生長激素抗獨特型抗體的制備及其生物特性的研究.pdf

1、豬生長激素(porcine growth hormone，pGH)是豬垂體前葉分泌的長為191個氨基酸的單鏈多肽類激素。生長激素是調節(jié)機體正常生長和發(fā)育的主要激素之一，它促進氨基酸進入細胞以及RNA的生物合成，從而加速蛋白質的合成，不僅促進骨的生長，且影響許多組織的生長；GH促進脂肪的分解以及脂肪酸氧化供能，加速脂類的代謝，顯著提高豬的生長速度、飼料報酬和瘦肉率。研制開發(fā)豬生長激素類飼料添加劑具有較高的商業(yè)價值和科研價值。 豬生

2、長激素最早從豬的垂體組織中提取，不僅費時費工，而且產量有限，無法在生產中推廣應用。隨著科技發(fā)展，國外最早于1983年用大腸桿菌生產出pGH后，人們開始通過生物工程方法制備豬生長激素。用生物工程方法制備豬生長激素，涉及基因調控、表達及蛋白質分離純化等多項技術。目前生物工程生產的豬生長激素由于蛋白質生物活性低、產量低、成本高、并且需連續(xù)、大劑量多次肌肉注射或皮下包埋等不足之處，限制了其應用。激素免疫學的興起，使有目的的改變內分泌平衡并產生有

3、意義的生理學效應成為可能，許多學者對此已進行了大量的實驗研究，已經取得很大成功。 本實驗采用純化的豬生長激素單克隆抗體作為抗原，免疫山羊，獲得羊抗豬生長激素抗獨特型抗體，并對其免疫特性進行鑒定。還以異硫氰酸熒光素(FITC)標記所獲得豬生長激素抗獨特型抗體作為探針，使之與豬肝細胞上生長激素受體結合，應用共聚焦激光掃描顯微鏡，觀察免疫熒光標記的豬生長激素抗獨特型抗體在豬肝細胞的結合情況，對生長激素抗獨特型抗體在結構上模擬生長激素的

4、結合特性進行定位研究，第三，在小白鼠上驗證其的促生長活性。研究結果發(fā)現，所獲得豬生長激素抗獨特型抗體具有與生長激素相似的免疫學特性。標記的生長激素抗獨特型抗體能夠與豬肝細胞膜生長激素受體特異性的結合。試驗證明所獲得的豬生長激素抗獨特型抗體作為豬生長激素的模擬物在結構上存在著與豬生長激素相似性。且在小白鼠的促生長活性試驗中證明豬生長激素抗獨特型抗體作為豬生長激素的模擬物對小白鼠具有促生長活性。 本實驗的研究結果為應用抗獨特型抗體促