奶牛飼料添加劑柑橘黃酮的實驗動物研究.pdf

1、隨著畜牧業(yè)和飼料工業(yè)的蓬勃發(fā)展，飼料添加劑的使用日趨廣泛?？股?、激素、促生長劑等人工合成飼料添加劑在畜牧業(yè)的長期大量應用，動物性食品的安全問題已引起人們的關(guān)注。解決這一問題的關(guān)鍵就是要嚴格控制奶牛飼料的安全，用綠色飼料添加劑替代普通飼料添加劑。 本研究通過藥理學試驗方法探討柑橘黃酮對實驗動物的免疫機能、抗氧化、抗菌抗炎、生長性能等的影響，為柑橘黃酮作為奶牛飼料添加劑的開發(fā)利用提供基礎(chǔ)實驗依據(jù)。 1.采用分光光度法測定柑

2、橘黃酮中總黃酮的含量，采用高效液相色譜法測定橙皮苷的含量。結(jié)果柑橘黃酮中總黃酮的含量為12.30％；橙皮苷的含量為5.72％。 2.小鼠灌胃最大受試藥物量測定結(jié)果顯示，柑橘黃酮小鼠灌胃給藥的最大量為17.86g·kg<'-1>·d<'-1>，提示柑橘黃酮毒性小，安全性好。 3.小鼠腹腔注射不同劑量(200、600 kg<'-1>·d<'-1>)的柑橘黃酮，連續(xù)給藥9天，測定小鼠日增重、日采食量。結(jié)果表明，低劑量(200k

3、g<'-1>·d<'-1>)的柑橘黃酮可使雌鼠的日增重增加9.35％，日采食量增加6.59％，但無統(tǒng)計學意義。提示柑橘黃酮(200kg<'-1>·d<'-1>)對雌性小鼠的生長有一定的促進作用。 4.小鼠腹腔注射不同劑量(200、600kg<'-1>·d<'-1>)的柑橘黃酮，連續(xù)給藥9天，測定小鼠免疫器官的臟器指數(shù)。結(jié)果表明，柑橘黃酮不同劑量組(200、600kg<'-1>·d<'-1>)的雌鼠脾指數(shù)和胸腺指數(shù)均明顯高于對照組

4、(P<0.05)。提示柑橘黃酮對雌性幼年小鼠有免疫增強作用。 小鼠腹腔注射不同劑量(200、600kg<'-1>·d<'-1>)的柑橘黃酮，連續(xù)給藥20天，測定小鼠巨噬細胞吞噬血中剛果紅溶液的能力。結(jié)果顯示，柑橘黃酮各劑量組小鼠巨噬細胞對血中剛果紅的吞噬能力明顯高于對照組(P<0.01)。提示柑橘黃酮能增強巨噬細胞的吞噬能力，增強機體非特異性免疫功能。 5.用D-半乳糖(D-galactose，1g·kg<'-1>·d<

5、'-1>)建立小鼠衰老模型，同時分別灌胃給予不同劑量(200、600kg<'-1>·d<'-1>)的柑橘黃酮。給藥42天后測定肝臟超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)。結(jié)果表明，柑橘黃酮顯著升高D-半乳糖致衰老小鼠的肝臟SOD酶活性(P<0.05和P<0.01)，同時明顯降低肝臟MDA水平(P<0.05和P<0.0 1)。提示柑橘黃酮具有較強的抗氧化作用。 6.采用試管稀釋法測定柑橘黃酮的抑菌作用，對5種常見細菌以及2種真

6、菌的最低抑菌濃度(MIC)進行了測定。結(jié)果表明，柑橘黃酮對金黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌作用最強、對大腸埃希菌、銅綠假單胞菌及乙型副傷寒沙門菌次之、對白色念珠菌和黑曲霉無抑菌作用。 7.SD雌性大鼠受孕第一天開始，灌胃不同劑量的柑橘黃酮(200、600mg·kg<'-1>·d<'-1>)直至產(chǎn)下子鼠后處死。孕鼠于產(chǎn)后72h，經(jīng)乳頭管灌注大腸桿菌內(nèi)毒素，建立大鼠乳腺炎模型，灌注后24 h處死大鼠，取乳腺組織固定，進行病理組織學觀察，

7、同時測定血清中堿性磷酸酶(AKP)的含量。結(jié)果表明，高劑量組(600mg·kg<'-1>·d<'-1>)柑橘黃酮能使內(nèi)毒素誘發(fā)的大鼠乳腺炎的炎癥反應減輕，柑橘黃酮高劑量組AKP的含量明顯低于模型組(P<0.01)。提示柑橘黃酮具有一定的抗炎作用。 綜上所述，柑橘黃酮毒性小，安全性高，具有抗氧化、抗炎、抗菌作用，并具有一定的免疫增強作用以及一定的促生長作用，本研究結(jié)果對該提取物作為奶牛飼料添加劑的開發(fā)具有一定的指導作用。但其在奶牛