羊源腸球菌溶血素產(chǎn)生條件的優(yōu)化及特性分析.pdf

1、腸球菌(Enterococcus)是人類(lèi)和動(dòng)物腸道的正常菌群，為一種重要的機(jī)會(huì)致病菌。正常腸道腸球菌一直以來(lái)作為微生態(tài)制劑使用，用于穩(wěn)定和調(diào)節(jié)腸道菌群。近年來(lái)，由于抗生素的濫用，使得腸球菌的感染不斷上升，成為醫(yī)院內(nèi)感染的主要致病菌。腸球菌溶血素(cytolysin/hemolysin)是腸球菌的一個(gè)重要毒力因子，可以溶解紅細(xì)胞，殺死白細(xì)胞及毒害心臟的作用。腸球菌溶血素的產(chǎn)生條件及其生物學(xué)特性是研究腸球菌致病性的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。 本

2、試驗(yàn)，首先分析了11株臨床分離株腸球菌的溶血性，并與30株健康羊分離株、1株標(biāo)準(zhǔn)G群鏈球菌(C55950-G)和1株標(biāo)準(zhǔn)腸球菌(F6-1.0130)進(jìn)行溶血性比較。以平板法(PA)、接觸法(CH)、上清法(SA)、培養(yǎng)法(CLH)和3種SA改進(jìn)法檢測(cè)上述菌對(duì)兔血和羊血的溶血性。結(jié)果表明，11株臨床分離株在PA法和CLH法中有7株對(duì)兔血有溶血性，其余4株不溶；CH法、SA法和3種SA改進(jìn)法測(cè)得11株均不溶血。但在羊血平板上溶血性較弱，僅有

3、4株α溶血。C55950-G在所有檢測(cè)方法均為溶血性。F6-1.0130對(duì)羊血平板有α溶血，而對(duì)兔血沒(méi)有溶血性。11株臨床分離株中有3株與標(biāo)準(zhǔn)腸球菌溶血性一致。30株健康羊分離株溶血性不穩(wěn)定，初次分離培養(yǎng)有16株β溶血，但多次傳代后，只有2株仍有溶血能力。因此，不同羊源腸球菌分離株的溶血性不一致，并且對(duì)羊血和兔血的溶血能力也有很大差別。腸球菌在3種SA改進(jìn)法中均不能溶兔血。推測(cè)羊源腸球菌溶血素必須在紅細(xì)胞誘導(dǎo)下才能產(chǎn)生，并且為細(xì)胞結(jié)合型

4、。 選擇一株溶血性較強(qiáng)的腸球菌E129-3株，利用CLH法檢測(cè)不同培養(yǎng)條件對(duì)其溶血素的影響。結(jié)果表明，種子液以2％接種THB，在pH8.5，40℃靜置培養(yǎng)12-24h的條件下溶血能力較好。小白鼠、兔、狗紅細(xì)胞對(duì)該溶血素最敏感；牛紅細(xì)胞對(duì)該溶血素不敏感。該溶血素可以被二硫蘇糖醇(DTT)、Ca<'2+>活化，被蛋白酶K、EDTA、Zn<'2+>、Cu<'2+>抑制。 利用光學(xué)顯微鏡，電子顯微鏡觀察E129-3菌株對(duì)兔紅細(xì)胞