橋本甲狀腺炎合并乳頭狀甲狀腺癌中miRNA表達(dá)差異的研究.pdf

1、目的: 篩選橋本甲狀腺炎（Hshimoto's thyroiditis，HT）合并甲狀腺乳頭狀癌(papillary thyroid carcinoma, PTC)組織中差異表達(dá)的miRNA，并進(jìn)行臨床驗(yàn)證。通過(guò)生物學(xué)軟件預(yù)測(cè)其靶基因，初步探索其作用機(jī)制。
　　方法: 將3例經(jīng)病理確認(rèn)的橋本合并PTC的新鮮組織標(biāo)本進(jìn)行總RNA提取，采用基因芯片技術(shù)進(jìn)行miRNA篩查，以3例良性結(jié)節(jié)性甲狀腺腫組織為正常對(duì)照。采用熒光定量PCR驗(yàn)證芯

2、片篩查結(jié)果。通過(guò)多個(gè)生物學(xué)軟件進(jìn)行miRNA靶基因預(yù)測(cè)，構(gòu)建調(diào)控網(wǎng)絡(luò)圖，并進(jìn)一步行mRNA芯片篩查所有預(yù)測(cè)靶基因的表達(dá)差異。收集橋本合并PTC、甲狀腺濾泡狀癌（Follicular thyroid carcinoma, FTC）、甲狀腺髓樣癌（Mudullary thyroid carcinoma, MTC）組織各10例，采用熒光定量PCR檢測(cè)各組標(biāo)本miR-130a表達(dá)，對(duì)芯片結(jié)果進(jìn)行臨床驗(yàn)證，分析以上三種病理類(lèi)型miR-130a表達(dá)

3、差異。
　　結(jié)果: miRNA芯片結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，橋本合并PTC組織中miR-130a表達(dá)量呈5倍下調(diào)(P=0.035)。熒光定量PCR結(jié)果顯示橋本合并PTC組miR-130a表達(dá)量下調(diào)2.25倍，與芯片結(jié)果一致。通過(guò)生物學(xué)軟件預(yù)測(cè)WNT10A為miR-130a的靶基因。mRNA芯片結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，橋本合并PTC組織中WNT10A基因表達(dá)上調(diào)16.9倍(P＜0.001)。熒光定量PCR結(jié)果顯示橋本合并PTC組WN

4、T10A基因表達(dá)上調(diào)17.8倍，與芯片結(jié)果一致。在HT合并PTC、甲狀腺濾泡狀癌、甲狀腺髓樣癌及結(jié)節(jié)性甲狀腺腫組織中進(jìn)行驗(yàn)證，結(jié)果顯示:各實(shí)驗(yàn)組miR-130a表達(dá)均下調(diào)。其中合并橋本的PTC組織miR-130a表達(dá)量為對(duì)照組的0.44倍，與之前的PCR驗(yàn)證結(jié)果一致。MTC、FTC中miR-130a表達(dá)量分別為對(duì)照組的0.09倍、0.15倍，以上差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　結(jié)論: 橋本合并PTC組織中miR-130