MiR-146a、IRAK1基因多態(tài)性和MiR-146a的表達在類風濕關節(jié)炎中的意義.pdf

1、目的:有研究顯示類風濕關節(jié)炎患者(RA)外周血單核細胞miR-146a表達增加,靶向抑制腫瘤壞死因子受體相關因子6(TRAF6)和白介素-1受體相關激酶1(IRAK1)功能障礙可能是RA患者TNF-α增多的重要原因之一。rs2910164位于miR-146a前體(pre-miR-146a)序列上,堿基G>C的突變導致其莖環(huán)區(qū)域G:U到C:U的錯配,可能影響成熟miR-146a的表達。本文探討rs2910164和IRAK1 rs30278

2、98、rs1059703多態(tài)性與中國中南部地區(qū)漢族人群類風濕關節(jié)炎易感性的關系,rs2910164多態(tài)性對miR-146a表達的影響,以及miR-146a表達的臨床意義。
　　方法:采用聚合酶鏈反應–連接酶檢測反應(PCR–LDR)方法檢測188例類風濕關節(jié)炎(RA)患者和220例健康對照者Pre-miR-146a rs2910164和IRAK1 rs3027898、rs1059703位點基因多態(tài)性,應用實時熒光定量聚合酶鏈反應檢

3、測68例RA患者、10例骨關節(jié)炎(OA)患者及20例健康對照外周血單個核細胞中miR-146a的表達水平,并選取10例RA疾病活動患者給予糖皮質激素+非甾體抗炎藥聯合免疫抑制劑正規(guī)治療3個月后再次檢測miR-146a表達水平。收集并統(tǒng)計RA患者臨床參數:年齡、性別、發(fā)病年齡、病程、疼痛關節(jié)數(TJC)、腫脹關節(jié)數(SJC)、VAS評分、HAQ評分、DAS28評分、血沉(ESR)、C反應蛋白(CRP)、RF和抗-CCP抗體滴度、關節(jié)功能分

4、級、X線分期。根據DAS28評分,病人被分為無明顯疾病活動組(DAS28≤3.2)和疾病活動組(DAS28>3.2),后者被分為中度活動組(3.25.1),根據X線分期,病人分為輕度骨破壞組(≤Ⅱ期)和嚴重骨破壞組(>Ⅱ期)。
　　結果:①RA組Pre-miR-146a rs2910164和IRAK1 rs3027898、rs1059703位點的基因型頻率和等基因頻率與健康對照組比較

5、,差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。②根據RF和抗-CCP抗體陰性和陽性將RA病人進行分組,分組后的4組上述三個位點位點的基因型頻率和等基因頻率與健康對照組比較,差異無統(tǒng)計學意義(均P>0.05)。③RA患者rs2910164和rs3027898、rs1059703位點基因型間的發(fā)病年齡、性別、RF和抗CCP抗體陽性率、RA疾病活動(除了rs3027898)、嚴重骨破壞均無統(tǒng)計學差異(均P>0.05)。④RA患者攜帶rs3027898

6、 CC基因型比CA+AA基因型疾病活動增加(P=0.024),多因素非條件Logistic回歸分析發(fā)現RA患者攜帶CC基因型疾病活動的風險是攜帶CA+AA基因型2.692倍(P=0.025,OR=2.692,95％CI=1.136～6.380)。⑤在RA患者和健康對照中,rs2910164多態(tài)性對miR-146a的表達無影響(均 P>0.05)。⑥RA患者組miR-146a的表達量高于健康對照組(P=0.000)和OA組(P=0.006

7、),OA組的表達量和健康對照組無統(tǒng)計學差異(P=0.823)。⑦健康對照組和無明顯疾病活動組(DAS28≤3.2)的miR-146a的表達量無統(tǒng)計學差異(P=0.879);無明顯疾病活動組表達量低于中度活動組(P=0.010)和高度活動組(P=0.000),中度活動組表達量低于高度活動組(P=0.004)。⑧疾病活動RA患者治療后miR-146a表達量下降(P=0.003)。⑨RA患者miR-146a的表達量在分別在性別(男性和女性)、

8、病程(≤2年和>2年)、骨破壞(≤Ⅱ期和>Ⅱ期)、RF(陰性和陽性)、抗-CCP抗體(陰性和陽性)間均無統(tǒng)計學差異(均P>0.05)。⑩miR-146a表達量與TJC、SJC、VAS評分、ESR、CRP、DAS28評分顯著正相關(依次r=0.529,P=0.000;r=0.412,P=0.000;r=0.523,P=0.000;r=0.493,P=0.000;r=0.323,P=0.007;r=0.551,P=0.000),與年齡、病程

9、、發(fā)病年齡、關節(jié)功能分級、X線分期、HAQ評分、RF和抗-CCP抗體滴度均無顯著相關性(依次r=0.114, P=0.353;r=0.006,P=0.960;r=0.116,P=0.348;r=0.045,P=0.718;r=0.033,P=0.789;r=0.162,P=0.188;r=0.096,P=0.435;r=-1.31,P=0.287)。
　　結論:我國中南部地區(qū)漢族人群中,Pre-miR-146a rs2910164