ATP介導Akt-mTOR-p70S6K信號轉導通路激活促進大鼠脊髓損傷后運動功能恢復.pdf

1、目的：作為在應對細胞外信號、生長因子、細胞能量狀態(tài)和應急等條件下的細胞生長、增殖、存活和分化的一個中樞性控制器，Akt/mTOR/p70S6K信號轉導通路最近在神經科學領域受到了極大的關注。但是它對脊髓損傷(spinal cordinjury，SCI)后修復的影響還沒有得到很好的闡釋。三磷酸腺苷(Adenosinetriphosphate，ATP)被認為是信號轉導通路的重要調節(jié)器，其在神經系統損傷后的功能恢復中起著重要作用。本實驗研究外

2、源性ATP對大鼠脊髓損傷后Akt/mTOR/p70S6K信號轉導通路活性的影響，并探討此信號轉導通路在大鼠脊髓損傷后神經運動功能恢復以及修復中的作用。
　　 方法：采用改良Allen's打擊器制成大鼠脊髓損傷模型。137只健康成年雌性SD大鼠分為四組：SCI+ATP組(n=35)、SCI+生理鹽水組(n=35)、SCI+ATP+雷帕霉素組(n=35)和假手術組(n=32)。分別于術后1、2、3、4周采用免疫組化、Western

3、blot和實時熒光定量RT-PCR分析方法檢測脊髓組織中Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR、p70S6K、p-p70S6K、nestin、NeuN、NSE、NF200和GFAP蛋白以及mRNA表達的變化，對取自各SCI組4周的脊髓行HE染色作大體組織學研究，并采用BBB運動功能評分方法評價各組大鼠脊髓損傷后運動功能恢復情況。
　　 結果：假手術組大鼠脊髓中Akt/mTOR/p70S6K信號轉導通路分子在蛋白和mRNA水平

4、上呈低水平表達，在脊髓損傷后其表達增加。外源性ATP可顯著增強大鼠受損脊髓中Akt/mTOR/p70S6K信號通路分子的表達，而雷帕霉素可明顯抑制ATP誘導的此信號通路分子表達的上調。激活的Akt/mTOR/p70S6K信號通路可顯著增加受損脊髓組織中的nestin、NeuN、NSE和NF200的表達，相對抑制脊髓損傷后過度的反應性星形膠質細胞增生，明顯提高大鼠脊髓損傷后BBB運動功能評分，而雷帕霉素阻礙了ATP誘導的上述效應。