光譜核型分析技術(shù)在染色體異常診斷中的應(yīng)用研究.pdf

1、如何對細小或復(fù)雜的染色體異常做出準確的核型分析一直是困擾細胞遺傳學(xué)診斷技術(shù)人員的難題之一。傳統(tǒng)的染色體顯帶核型分析由于其分辨率較低，往往難以對復(fù)雜易位做出準確判斷，而且操作費時費力。FISH與顯帶技術(shù)相比具有簡便、快速、特異性高等優(yōu)點，但是FISH技術(shù)往往要建立在已知的核型分析基礎(chǔ)上，對沒有任何可以確定的條帶模式的未知染色體異常，檢測就變得十分困難。在FISH技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的SKY技術(shù)通過5種不同的熒光素及其組合分別標記24種人類染

2、色體涂染探針，可以通過一次雜交反應(yīng)同時檢測所有染色體，為復(fù)雜性染色體異常的檢測提供了可能。目前，國內(nèi)對SKY技術(shù)研究和臨床應(yīng)用還不夠全面和深入，特別是對SKY在臨床細胞遺傳學(xué)診斷方面的應(yīng)用價值缺乏系統(tǒng)而全面的評估。本工作應(yīng)用建立的SKY技術(shù)對包括復(fù)雜性和隱匿性染色體異常在內(nèi)的多個中期染色體樣本進行診斷，研究其臨床應(yīng)用的最適范圍，以及如何與其他技術(shù)相結(jié)合對復(fù)雜性染色體異常進行有效分析，從而為建立有序的臨床診斷規(guī)范提供實驗依據(jù)。 第

3、一部分光譜核型分析技術(shù)在染色體異常診斷中的應(yīng)用 目的:建立穩(wěn)定的光譜核型分析技術(shù)，并評價其在染色體異常診斷中的應(yīng)用價值。 方法:應(yīng)用光譜核型分析技術(shù)分別對22例G-顯帶診斷為“正常”、“平衡易位”、“不平衡易位”以及“標記染色體”的外周血或羊水細胞染色體樣本樣本進行檢測，并與G-顯帶診斷結(jié)果進行比較。 結(jié)果:所建立的光譜核型分析技術(shù)不但成功地對全部15例G-顯帶診斷結(jié)果為正?；蚱胶庖孜坏臉颖具M行了正確診斷，而且對

4、G-顯帶無法識別的6例外周血樣本的衍生染色體片段和1例羊水樣本的標記染色體亦明確了來源。 結(jié)論:光譜核型分析技術(shù)對染色體異常的診斷具有很高的敏感性和特異性，并且在明確傳統(tǒng)核型分析技術(shù)不能分析的標記染色體或衍生染色體片段的來源方面具有重要應(yīng)用價值。認為對于G-顯帶診斷困難或無法分析的病例，SKY可以提供更多的信息，有著獨特的優(yōu)勢；而對于G-顯帶可以明確診斷的病例，SKY技術(shù)優(yōu)勢不明顯。 第二部分光譜核型分析聯(lián)合熒光原位雜交

5、技術(shù)對不平衡易位家系的研究 目的:進一步研究(X：1)不平衡易位患者在成年期的基因型一表型的關(guān)系們認為應(yīng)用SKY對染色體異常進行篩查并用FISH技術(shù)進行驗證是對G-顯帶技術(shù)未能明確的復(fù)雜性染色體異常進行分析的有效途徑。 方法:病例報道。 結(jié)果:本研究聯(lián)合應(yīng)用SKY技術(shù)和亞端粒FISH技術(shù)對一個不平衡易位樣本t(X；1)(q27；q31)進行了明確診斷，并首次描述了這種不平衡易位在成人期的臨床特征。該患者主要存在卵