硝化細菌分離和培養(yǎng)以及對人造水草預固定技術在室內對蝦集約化養(yǎng)殖中的應用.pdf

1、硝化細菌(Nitrifying bacteria)包括亞硝化菌(Nitrite bacteria)、硝化菌(Nitrate bacteria)兩個生理菌群，在自然界氮循環(huán)中發(fā)揮著重要功能，其生長特點是需要表面積大的附著載體，同時需要一定的成熟期(兩周左右)。而人造水草有很大的比表面積(2000m<'2>/m<'3>)，可作為微生物良好的附著、固定載體。本試驗通過從本土養(yǎng)殖環(huán)境中分離得到純種硝化細菌，研究人造水草固定硝化細菌的技術，將養(yǎng)殖

2、初期水體中的氨氮、亞硝酸氮控制在較低水平，為對蝦生長提供良好的環(huán)境，為室內對蝦集約化養(yǎng)殖的水質凈化提供參考依據。 經反復初步分離篩選，采用瓊脂平板純化分離技術從對蝦養(yǎng)殖環(huán)境中得到5株優(yōu)勢純種亞硝化菌和3株優(yōu)勢純種硝化菌，并進行格蘭氏染色作初步觀察。分離得到幾株亞硝化菌在瓊脂平版上長出的菌落大小為約0.3～0.8mm，而硝化菌菌落約0.5～1.0mm。分離得到的硝化細菌大部分呈桿狀，亞硝化菌細胞長約0.5～1.0μm，而硝化菌細胞

3、長約1.0～1.5μm。設計一套簡易培養(yǎng)系統(tǒng)培養(yǎng)分離得到的幾種硝化細菌，根據培養(yǎng)結果選出其中最具優(yōu)勢的亞硝化菌和硝化菌，同時檢驗應用該模式進行硝化細菌培養(yǎng)的效果。培養(yǎng)結果表明，初篩的幾株硝化細菌基本上都有較強的生長和代謝能力。通過比較細菌生長能力和硝化能力篩選出Y105和X101分別是初篩的幾株亞硝化菌和硝化菌中最具優(yōu)勢的菌株。培養(yǎng)結果也證明了所設計的簡易培養(yǎng)模式是簡單有效的。亞硝化菌富集培養(yǎng)時間為13～19d，硝化菌為6～12d左右，

4、這期間可以不需要補加培養(yǎng)基，也不需要調整pH值，只要保證適宜的溫度和溶解氧，就可以得到較高密度(約10<'6>～10<'8>cell/ml)的亞硝化菌和硝化菌。結果說明從養(yǎng)殖環(huán)境中可以分離得到高效硝化細菌。 研究了在人造水草上進行硝化細菌固定化的最佳條件。以細菌初始接種密度、固定化時間、固定化人造水草選材、固定化pH、固定化溫度為研究對象進行正交實驗設計，得出這些條件因子對硝化細菌固定化效果的影響。實驗結果表明，當用3號人造水草

5、作為生長基質、接種密度為10<'5>cell/ml、溫度30℃、pH為7的條件下固定生長16d，每g人造水草上的亞硝化菌可達8.4×10<'9> cells；而當用3號人造水草作為生長基質、接種密度為10<'4>cell/ml、溫度30℃、pH為10的條件下固定生長16d，每g人造水草上的亞硝化菌可達4.8×10<'9> cells。這說明通過硝化細菌固定化技術有可能大大提高養(yǎng)殖水體中局部硝化細菌的密度。正交實驗結果方差分析表明，固定化

6、時間對亞硝化菌和亞硝化菌在人造水草上的固定化效果均有顯著影響。 研究了固定硝化細菌的人造水草在室內對蝦養(yǎng)殖中的使用效果。結果發(fā)現，整個養(yǎng)殖期間，對照池中氨氮濃度相對較高，與其它3口試驗池差異顯著(P<0.01)。在養(yǎng)殖試驗初始4d，采用未固定硝化細菌的人造水草的對照池，亞硝酸氮一直上升，最高值達到0.91mg/l，而投加固定硝化細菌的人造水草的實驗池則從試驗開始便一直快速下降。試驗結果表明固定硝化細菌的人造水草硝化能力較強，前期