植物根系胞外酶原位顯色新方法的建立.pdf

1、土壤酶是土壤中活躍的有機成分，它主要是由微生物和植物的分泌以及生物的殘體分解產生，其主要作用是分解土壤內的有機成分，使植物更容易吸收，防御病原菌的侵害，以及促進碳氮磷等元素的循環(huán)，是生態(tài)環(huán)境中重要的一份子。本試驗為了能更好的保持植物根際原位面，自主設計了適宜植物根系胞外酶研究的單側觀察可拆卸式植物根箱設備;建立了新的植物根系胞外酶原位顯色方法;利用新的胞外酶原位顯色方法，針對原位、動態(tài)的地下環(huán)境，對土壤中胞外酶的范圍及活性進行定量分析，

2、對植物互作和氮素施加兩種處理進行酶活測定，判斷該顯色方法的準確性和應用性。主要結果如下:
　　1.本試驗自主設計了單側觀察可拆卸式植物根箱設備。該設備采用了滑道插入式設計，利用PVC板材進行了根箱四壁的加厚設計，以及在根箱內部采用了有機玻璃板。該設備的滑道設計能有效地避免水土從接縫處流失并且易于取下，雙層有機玻璃板能保護并形成良好的植物根際原位面，為原位測定植物根系胞外酶提供了良好的樣品。
　　2.建立了原位酶活顯色的新方法

3、，該方法利用瓊脂糖凝膠作為熒光物的顯色媒介，選用302nm波長的紫外光作為檢測波長，特異性的熒光底物濃度為1.5mg/mL。與原有的顯色方法相比，該方法的顯色效果更清晰、范圍更明顯，觀測及數據獲取更為方便。
　　3.通過10cm2面積的凝膠，采用新的原位顯色方法對α-淀粉酶、β-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶和幾丁質酶進行測定，確定底物充足時的用量，獲得了良好的熒光圖像，證明新建立的胞外酶原位顯色方法是可行且有效的。
　　4.利用