9002號海洋放線菌代謝產物抗腫瘤活性化合物的研究.pdf

1、該課題對中國膠州灣海域海平面下20米處的海泥樣品進行微生物的分離純化,并通過溫敏型小鼠乳腺癌細胞株tsFT210細胞周期抑制、細胞凋亡誘導篩選模型篩選,初篩得到20株代謝產物具有良好抗腫瘤活性的放線菌.經過活性的復篩、代謝產物穩(wěn)定性測試、發(fā)酵液萃取等預實驗選取其中一株編號為9002的放線菌.確定活性菌株后測試其生長曲線,根據生長特征進行大量發(fā)酵,有機溶劑提取得到代謝產物浸膏.利用對代謝產物進行提取分離和活性追蹤同步進行的方法,對9002

2、菌株的發(fā)酵產物進行活性成分追蹤分離.9002的菌懸液和菌絲體分別用氯仿萃取,然后將兩個成分合并.對得到的有效活性部位采用正相減壓硅膠柱層析、常壓硅膠柱層析、凝膠柱層析(Sephadex LH-20)、反相硅膠柱層析、反相制備高效液相(PHPLC)等分離手段得到6個單體化合物、2個差向異構體的混合物和1個結構未確定的化合物.根據理化性質和各種波譜學方法,鑒定了其中6個單體化合物和2個差向異構體的結構.SRB活性測試實驗結果表明化合物(1)

3、、(2)、(3)、(4)、(6)對tsFT210小鼠乳腺癌細胞的生長具有抑制作用.通過tsFT210小鼠乳腺癌細胞周期抑制、細胞凋亡誘導篩選模型篩選發(fā)現化合物(3)、(6)具有抗腫瘤活性.綜上所述,該項研究工作自海洋放線菌9002中分離得到6個化合物和2個差向異構體,其中含有7個環(huán)縮二氨酸化合物和一個吡啶類化合物.首次發(fā)現了化合物6具有G<,2>/M周期抑制作用,化合物3具有細胞壞死和G<,0>/G<,1>周期抑制活性.該實驗為開發(fā)應用