香蕉穿孔線蟲(chóng)（Radopholus similis）rDNA-ITS序列分析及其對(duì)生物殺線蟲(chóng)劑敏感性測(cè)定.pdf

1、本文對(duì)來(lái)自于不同地區(qū)的7個(gè)香蕉穿孔線蟲(chóng)(Radopholus similis)群體進(jìn)行了分子鑒定,對(duì)其ITS區(qū)域進(jìn)行序列測(cè)定和分析.并采用6個(gè)藥劑對(duì)該線蟲(chóng)進(jìn)行了的室內(nèi)毒力測(cè)定. 通過(guò)研究香蕉穿孔線蟲(chóng)在胡蘿卜片上的離體培養(yǎng),闡述了培養(yǎng)時(shí)間、接種量以及單頭雌蟲(chóng)接種對(duì)其在胡蘿卜片上繁殖率的影響.結(jié)果表明,接種了香蕉穿孔線蟲(chóng)的胡蘿卜片60天后進(jìn)行分離,可以獲得最火的繁殖量,每個(gè)胡蘿卜片上接種量為25頭時(shí)線蟲(chóng)的繁殖量最大,另外證明了香蕉穿孔線蟲(chóng)可

2、能進(jìn)行孤雌生殖. 利用Ferris et al(1993)通用引物對(duì)7個(gè)不同群體來(lái)源的香蕉穿孔線蟲(chóng)的ITS進(jìn)行PCR擴(kuò)增,得到長(zhǎng)706bp的目的片段.對(duì)這些:ITS片段序列進(jìn)行克隆及測(cè)序,然后與己知的香蕉穿孔線蟲(chóng)ITS片段序列進(jìn)行序列比對(duì)分析及同源性比較分析,結(jié)果表明它們的同源率為99.09﹪. 根據(jù)香蕉穿孔線蟲(chóng)rDNA-ITS區(qū)的序列特征,設(shè)計(jì)了一對(duì)特異性引物RsFl/RsRl,特異擴(kuò)增片段為271bp;用線蟲(chóng)通用引物

3、D3A/D3B作內(nèi)標(biāo),設(shè)計(jì)出一步雙重PCR技術(shù)用于香蕉穿孔線蟲(chóng)種群的特異性分子檢測(cè),該檢測(cè)具有較好的特異性,且耗時(shí)較短、操作簡(jiǎn)便,證實(shí)該研究是成功和可靠的. 香蕉穿孔線蟲(chóng)是我國(guó)一類對(duì)外檢疫線蟲(chóng).由于其對(duì)世界各大香蕉產(chǎn)區(qū)的危害嚴(yán)重性和經(jīng)濟(jì)重要性,因此對(duì)該線蟲(chóng)進(jìn)行藥劑防治研究具有非常重要的現(xiàn)實(shí)意義.從6個(gè)藥劑對(duì)香蕉穿孔線蟲(chóng)的室內(nèi)毒力測(cè)定結(jié)果可以看出,印楝素(EC)和阿維菌素(EC)是值得推薦的兩種生物藥劑.化學(xué)藥劑丁硫克百威對(duì)香蕉穿