敘利亞金黃地鼠高脂血癥和動脈粥樣硬化模型快速建立及藥效學評價關鍵技術研究.pdf

1、高脂血癥和動脈粥樣硬化病理改變是冠心病最重要的誘發(fā)因素。制作近人類、質量可控、可重復、規(guī)范化、評價指標系統(tǒng)化的高脂血癥和動脈粥樣硬化動物模型不僅能為心腦血管疾病基礎與臨床病理生理研究提供合適的病理模型，同時也能為心腦血管創(chuàng)新藥物臨床前藥效學評價提供技術支持。
　　現有研究發(fā)現大鼠等嚙齒類高脂血癥和動脈粥樣硬化動物模型在脂質損害易感性及脂代謝特點與人類存在較大差異等缺陷，而金黃地鼠與其他動物相比在脂代謝方面與人類具有更多的相似之處。

2、本研究采用高脂飼料(HFHC)和超高脂飼料（extra-HFHC）兩種配方進行造模，快速誘導出高脂血癥和動脈粥樣硬化模型，同時綜合應用血脂測定和脂蛋白分離、超聲影像分析、全血細胞分析等技術，分別對短、中、長期（4、21、42周）高脂血癥模型組造模前和造模后第1、2、3、6、9、12、15、18、21、23、26、34和42周血脂水平進行動態(tài)連續(xù)監(jiān)測;對中、長期(21、42周)動脈粥樣硬化模型組造模前和造模后第3、6、9、14、16、20

3、、24和42周血脂水平進行動態(tài)連續(xù)監(jiān)測;采用脂蛋白分離、組織病理學和分子生物學等方法對不同時期實驗終點動物脂蛋白、脂質損害靶器官形態(tài)學和脂代謝相關蛋白群表達進行觀察，并與大鼠和人類進行初步種屬差異性比較。
　　結果顯示:
　　①給予高脂飼料1周后，高脂血癥模型動物血清極低密度脂蛋白膽固醇(VLDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)，高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)和甘油三酯(TG)水平顯著上升，至18周時血脂水平出現下

4、降并進入平穩(wěn)期;給予高脂飼料3周后，動脈粥樣硬化模型組血脂大幅度迅速上升，3周后血脂水平出現下降并進入平穩(wěn)期。
　?、谥鞍讏D譜分析結果表明，高脂血癥模型短期組血清中極低密度脂蛋白(VLDL)和低密度脂蛋白(LDL)水平顯著增加，高密度脂蛋白(HDL)水平不變;高脂血癥模型中期和長期組血清VLDL水平仍保持較高水平，HDL水平顯著下降。動脈粥樣硬化模型中、長期組血清VLDL和LDL水平顯著升高，HDL水平不變;動脈粥樣硬化模型中期

5、組高密度脂蛋白膽固醇運載能力顯著上升，長期組與正常對照組相比無顯著變化，提示動脈粥樣硬化模型動物體內血脂紊亂程度呈惡化趨勢。
　　③超聲影像學和病理學結果顯示，高脂血癥模型短期組動物肝臟出現脂質堆積，且隨造模時間的延長脂肪肝病變加重;高脂血癥模型中期組主動脈弓部內模-中膜最大厚度顯著增加。動脈粥樣硬化模型中期動物主動脈弓部和根部都形成向內腔突起的斑塊，長期組斑塊數量增多，切面積增大。
　?、芨咧Y模型短期組腫瘤壞死因子-α

6、和白介素-10顯著高于正常對照組。動脈粥樣硬化模型中期組動物白細胞總數、中性粒細胞和嗜酸性粒細胞數目顯著上升，肝臟中腫瘤壞死因子-α顯著高于正常對照組，而白介素-1β顯著低于正常對照組。長期組腫瘤壞死因子-α、白介素-1β、白介素-6和白介素-10顯著低于正常對照組。
　?、莸鞍妆磉_分析結果表明，高脂血癥模型和動脈粥樣硬化模型動物肝臟固醇反應元件結合蛋白2(SREBP2)表達始終呈現下調趨勢。高脂血癥模型短、中、長期組與正常組對比

7、肝臟羥甲戊二酰輔酶A還原酶(HMGCR)表達無顯著變化，短期組肝臟B型清道夫受體Ⅰ(SR-BI)表達上調，中期和長期組肝臟低密度脂蛋白受體(LDL-R)、固醇O-酰基轉移酶(SOAT1)和SR-BI表達顯著下降，長期組動物肝臟ATP結合盒轉運子1(ABCA1)表達顯著上升，卵磷脂膽固醇酰基轉移酶(LCAT)表達顯著下降。動脈粥樣硬化模型中期組動物肝臟HMGCR表達無顯著變化，LDL-R和膽固醇7α羥化酶(CYP7A1)表達顯著下降，AB

8、CA1表達顯著上升，長期組動物肝臟中SREBP2、HMGCR、LDL-R、SR-BI、SOAT1、LCAT、CYP7A1的表達顯著低于正常對照組，ABCA1表達水平顯著高于正常對照組。
　?、蕹醪椒N屬差異性比較表明:與大鼠相比，金黃地鼠脂蛋白譜與人類更為相近，對膳食中膽固醇和甘油三酯敏感性更高。
　　采用高脂喂飼法可快速建立金黃地鼠高脂血癥和動脈粥樣硬化模型，應用各種檢測技術方法，對金黃地鼠血脂、脂蛋白、脂毒性靶器官和脂代謝